合肥学院：荧光光谱分析仪（PPT讲稿）

荧光光谱分析仪 分析测试中心 陈仕云

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A 分子荧光光谱仪 B 原子荧光光谱仪

A 分子荧光光谱仪 B 原子荧光光谱仪

第一节荧光光谱分析仪 2013/12/26

第一节 荧光光谱分析仪

概述 荧光:某些物质吸收光能量后,可发射浪长与 激发光波长相同或不同的光,当激发光源停止 照射试样时,再发射过程立即停止,这种再发 射的光称为荧光( fluorescence)。荧光包括 分子荧光和原子荧光。 荧光分析法:通过测定物质分子产生的荧光强 度进行物质的定性与定量分析的方法。 荧光光谱仪:采用荧光分析法来测量的仪器

一、概 述 荧光：某些物质吸收光能量后，可发射波长与 激发光波长相同或不同的光，当激发光源停止 照射试样时，再发射过程立即停止，这种再发 射的光称为荧光（fluorescence）。荧光包括 分子荧光和原子荧光。 • 荧光分析法：通过测定物质分子产生的荧光强 度进行物质的定性与定量分析的方法。 • 荧光光谱仪：采用荧光分析法来测量的仪器

概述 >荧光产生机制物质的分子吸收了照射光的能 量后,处于基态最低能级的分子被激发到电 子激发态的各个振动能级。被激发的分子与 周围的分子碰撞,并把部分能量以热能的形 式传给周围的分子,自己降落到单线第二电 子激发态的最低振动能级。然后,由此最低 振动能级向基态的各个振动能级跃迁,同时 以发光的形式释放出其能量。这种光即为荧 光

一、概 述 ➢ 荧光产生机制 物质的分子吸收了照射光的能 量后，处于基态最低能级的分子被激发到电 子激发态的各个振动能级。被激发的分子与 周围的分子碰撞，并把部分能量以热能的形 式传给周围的分子，自己降落到单线第二电 子激发态的最低振动能级。然后，由此最低 振动能级向基态的各个振动能级跃迁，同时 以发光的形式释放出其能量。这种光即为荧 光

概述 S? 1振动弛豫 2.内转换 片套 3猝灭 4.系间跨越 s单重态 T多重态 入 λ12激发波长;x荧光3磷光 分子去活化过程及荧光产生示意图

一、概 述 1.振动弛豫 2.内转换 3.猝灭 4.系间跨越 s单重态 T多重态 1 ,2激发波长; 荧光 3磷光 分子去活化过程及荧光产生示意图

概述 >荧光分析的特点 优点:灵敏度高(可达10~129数量级); 选择性强,有利于分析复杂的多组分混合物 用样量少、特异性好、操作简便。 ⑧缺点:对温度、pH值等因素变化比较敏感; 应用范围较窄,只能用来测量发荧光的物质, 或与某些试剂作用后发荧光的物质

一、概 述 ➢荧光分析的特点 ☺优点：灵敏度高（可达10～12g数量级）； 选择性强，有利于分析复杂的多组分混合物； 用样量少、特异性好、操作简便。 缺点：对温度、pH值等因素变化比较敏感； 应用范围较窄，只能用来测量发荧光的物质， 或与某些试剂作用后发荧光的物质

二、荧光分析的基本原理 (一)激发光谱和荧光光谱 任何发射荧光的物质都具有两个特征光谱, 即激发光谱( excitation spectrum)和荧光光 iE(fluorescence spectrum) 激发光谱和荧光光谱是荧光分析中定性和定量 的基础

二、荧光分析的基本原理 （一）激发光谱和荧光光谱 • 任何发射荧光的物质都具有两个特征光谱， 即激发光谱（excitation spectrum）和荧光光 谱(fluorescence spectrum)。 • 激发光谱和荧光光谱是荧光分析中定性和定量 的基础

二、荧光分析的基本原理 激发光谱:连续改变激发光波长,固定荧光发 射波长,测定不同波长的激发光照射下,物质 溶液发射的芠光强度的变化。 以激发光波长为横坐标,荧光强度为纵坐标作 图,即可得到荧光物质 的激发光谱。 从激发光谱图上可找到 发生荧光强度最强的 激发波长λeX

➢ 激发光谱：连续改变激发光波长，固定荧光发 射波长，测定不同波长的激发光照射下，物质 溶液发射的荧光强度的变化。 ➢ 以激发光波长为横坐标，荧光强度为纵坐标作 图，即可得到荧光物质 的激发光谱。 从激发光谱图上可找到 发生荧光强度最强的 激发波长λex

二、荧光分析的基本原理 >荧光光谱:用λex作激发光源,并固定强度,测 定不同浪长的荧光强度。 >以荧光浪长为横坐标,荧光强度为纵坐标作图, 便得荧光光谱。荧光强度最强的浪长为λem。 荧光物质的入ex和入em 是鉴定物质的依据,也 是定量测定中所选用的 最灵敏的波长

➢ 荧光光谱：用λex作激发光源，并固定强度，测 定不同波长的荧光强度。 ➢ 以荧光波长为横坐标，荧光强度为纵坐标作图， 便得荧光光谱。荧光强度最强的波长为λem 。 • 荧光物质的λex和λem 是鉴定物质的依据，也 是定量测定中所选用的 最灵敏的波长