厦门大学：《仪器分析及实验技术》课程教学资源（PPT课件）第十一章 高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography

第十一章高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography

第十一章 高效液相色谱法 High Performance Liquid Chromatography

1基本概念和术语 以液体为流动相的色谱法称为液相色谱。高效 能固体细微粒为固定相,高压溶剂为流动相,配备 高灵敏度检测器的液相色谱为高效液相色谱。 术语 A、被分离组份,被分离物质,溶质 B、流动相,溶剂,洗脱剂 C、固定相包括:载体(担体)、涂层 D、流出液、洗出液

11.1 基本概念和术语 以液体为流动相的色谱法称为液相色谱。高效 能固体细微粒为固定相，高压溶剂为流动相，配备 高灵敏度检测器的液相色谱为高效液相色谱。 术语： A、被分离组份，被分离物质，溶质 B、 流动相，溶剂，洗脱剂 C、固定相包括：载体（担体）、涂层 D、流出液、洗出液

12分类和特 分类: 分配色谱:经典液液分配色谱 化学键合相色谱(分配+吸附) 极性键合相色谱 非极性键合相色谱 (反相化学键合相、离子对色谱) x聚合物基底的反相色谱

11.2 分类和特点 分类： • 分配色谱：经典液液分配色谱 化学键合相色谱（分配+吸附） 极性键合相色谱 非极性键合相色谱 （反相化学键合相、离子对色谱） * 聚合物基底的反相色谱

12分类和特 分类: 吸附色谱 离子交换色谱 阳离子交换色谱 阴离子交换色谱 离子色谱 分子排阻色谱 凝胶过滤色谱 凝胶渗透色谱

11.2 分类和特点 分类： • 吸附色谱 • 离子交换色谱 阳离子交换色谱 阴离子交换色谱 离子色谱 • 分子排阻色谱 凝胶过滤色谱 凝胶渗透色谱

特点: 与经典LC比,快速、高效、高灵敏度 与GC比,慢速,但可分离难气化物质 A.高压:150-300Kg/cm2 B.高速:1-10mL/min C.高效:>5000塔板/m D.采用高灵敏度检测器

特点： ❑ 与经典LC比，快速、高效、高灵敏度 ❑ 与GC比，慢速，但可分离难气化物质 A. 高压：150-300 Kg/cm2 B. 高速：1-10 mL/min C. 高效：5000 塔板/m D. 采用高灵敏度检测器

1.3反相色谱 11.3.1保留和分离机理 以非极性键合或聚合物基底固定相为固定相,以 极性溶剂为流动相,利用被分离组份在两相中的分配 差异和在固定相上吸附的差异,使之彼此分离

11.3 反相色谱 11.3.1 保留和分离机理 以非极性键合或聚合物基底固定相为固定相，以 极性溶剂为流动相，利用被分离组份在两相中的分配 差异和在固定相上吸附的差异，使之彼此分离

11.3.2固定相 以硅胶为基底的硅氧烷:C18、ODS、 octadecylsilane 以聚合物为基底: PSDVB 11.3.3流动相 乙腈、甲醇、乙醇、水(缓冲液) 11.34流出次序 极性大的先流出,基团小的先流出

11.3.2 固定相 以硅胶为基底的硅氧烷：C18、ODS、octadecylsilane 以聚合物为基底：PSDVB 11.3.3 流动相 乙腈、甲醇、乙醇、水（缓冲液） 11.3.4 流出次序 极性大的先流出，基团小的先流出

OCH3 CH2?CH-CH 0-Si-(CH2)17CH3 OCH3 SO3 H CH2?CH-CH2? CH2?CH-CH2? CH?CH2?CH-CH2?CH-CH2? CH2 N(ch3)3 Cl

O (CH2 )17 CH3 OCH3 Si OCH3 CH2 ? CH CH2 ? CH? CH2 ? CH CH2 ? CH CH2 ? SO3 H - + CH2 ? CH CH2 ? CH2 ? CH CH2 ? CH2 N(CH3 )3 + Cl-

114离子交换色谱 11.4.1保留和分离机理 以离子交换剂为固定相,借助于试样中电离 组份对固定在交换剂基体上带相反电荷的离解部 位亲合力的不同,使其彼此分离

11.4 离子交换色谱 11.4.1 保留和分离机理 以离子交换剂为固定相，借助于试样中电离 组份对固定在交换剂基体上带相反电荷的离解部 位亲合力的不同，使其彼此分离

1142固定相 交联聚苯乙烯为基体的离子交换树脂 硅胶为基体的键合离子交换剂 强酸型、弱酸型、强碱型、弱碱型

11.4.2 固定相 交联聚苯乙烯为基体的离子交换树脂 硅胶为基体的键合离子交换剂 强酸型、弱酸型、强碱型、弱碱型