厦门大学：《仪器分析及实验技术》课程教学资源（PPT课件）第十二章 高效毛细管电泳 High Performance Capillary Electrophoresis（一）

12高效毛细管电泳 效毛管电

12 高效毛细管电泳

21基本概念 电泳:一个“自由”带电粒子在一定介质中在电场作 用下的迁移 淌度:μ表述物质电泳特性的参数,与粒子电荷、质 量、半径、介质等有关

12.1 基本概念 电泳：一个“自由”带电粒子在一定介质中在电场作 用下的迁移 淌度：μep 表述物质电泳特性的参数，与粒子电荷、质 量、半径、介质等有关

电渗:μ由于粘滞阻力的存在,离子的电泳会带动溶 剂同向运动。正负离子当量数相同时,溶剂受到大小相 等方向相反的作用力,因此通常观测不到溶剂的运动。 若设法使某种离子不运动,则作用于溶剂的力便失去了 平衡,溶剂发生单向流动,这种流动称电渗

电渗： μeo由于粘滞阻力的存在，离子的电泳会带动溶 剂同向运动。正负离子当量数相同时，溶剂受到大小相 等方向相反的作用力，因此通常观测不到溶剂的运动。 若设法使某种离子不运动，则作用于溶剂的力便失去了 平衡，溶剂发生单向流动，这种流动称电渗

在不考虑相互作用的前提下,粒子在毛细管介质中 的运动速度是泳流速度和渗流谏度的矢量和。一般情况 下,电渗流速度是电泳流速度的5-7倍,混合物中所有 的组份随电渗流朝一个方向迁移。 -Veo+vep=lu eo+u epe 式中E:场强 e电泳淌度 电渗淌度

在不考虑相互作用的前提下，粒子在毛细管介质中 的运动速度是泳流速度和渗流速度的矢量和。一般情况 下，电渗流速度是电泳流速度的5-7倍，混合物中所有 的组份随电渗流朝一个方向迁移。 式中 E：场强 μeo电泳淌度 μep电渗淌度 V Veo Vep (μ eo μ ep)E      = + = +

12.2原理 电渗流方向:高电位→低电位 正溶质离子所受的力:电场力+电渗力 负溶质离子所受的力:电场力-电渗力 中性分子所受的力:电渗力 柱效:N=554(t1/W12)2t、W2取同一单位

12.2 原理 •电渗流方向：高电位 低电位 •正溶质离子所受的力：电场力+ 电渗力 •负溶质离子所受的力：电场力− 电渗力 •中性分子所受的力：电渗力 柱效：N＝5.54（tR /W1/2) 2 tR、W1/2取同一单位

溶质迁移方向由电场力和电渗力的矢量和决定,一般来说, 溶质迁移方向与电渗流同 流出顺序:①正离子②中性粒子③负离子 @/ ⊕。电渗流 Q 压 地 @@/@/@/@

• 溶质迁移方向由电场力和电渗力的矢量和决定，一般来说， 溶质迁移方向与电渗流同。 流出顺序：①正离子 ②中性粒子 ③负离子 高压 (+) Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ  Θ  Θ  Θ  Θ  Θ  Θ  Θ  Θ 电渗流 (－) 地

电渗流 (+) X X X X 地 高压 @@@//@∥

电渗流 Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ X － X － X － X － X － （－） 高压 （＋）地

123高效毛细管电泳仪器装置图 清洗 毛细管 记录 检测器 高压电源 电解液

12.3 高效毛细管电泳 仪器装置图 清洗 记录 检 测 器 高 压 电 源 毛细管 电解液

12.3.1高压电源 0-30KV输出,恒压恒流,正负极性可调。Pt丝为电 极 232进样系统 A、重力(高度差)进样 B、负压进样 C、电渗法进样 123.3分离系统 毛细管:ID.:50um-75um,长30-100cm

12.3.1 高压电源 0--30KV输出，恒压恒流，正负极性可调。Pt丝为电 极 12.3.2 进样系统 A、重力（高度差）进样 B、负压进样 C、电渗法进样 12.3.3 分离系统 毛细管：I.D.：50m-75m，长30-100cm

1234检测系统 商品仪器:UVⅥS,加石英聚焦镜;激光荧光 实验室:质谱,电分析 123.5清洗系统 般用负压法,NaOH洗液,减少吸附,清洗对重 现性影响重大

12.3.4 检测系统 商品仪器：UV-VIS，加石英聚焦镜；激光荧光 实验室：质谱，电分析 12.3.5 清洗系统 一般用负压法，NaOH洗液，减少吸附，清洗对重 现性影响重大