延安大学：《生理学 Human Physiology》实验教学_血液实验_实验十二 凝血时间的测定

实验十二凝血时间的测定 目的和原理 血液离开血管数分钟后,就由流动的溶胶状态变成了不能流动的胶冻状态,这一过程称为血液 凝固,简称血凝。血液自离开血管到凝固所需的时间称为凝血时间( coagulation time, clotting time,CT)。由于血浆内具备了发生凝血的各种物质,所以离体后的血液,在接触带负 电荷的表面(如玻璃器材)时,即可启动凝血过程。凝血过程大体上可分为三个阶段:1.凝血酶原 激活物的生成;2.凝血酶原激活物将凝血酶原激活为凝血活酶;3.凝血活酶将纤维蛋白原转变为纤 维蛋白。凝血时间的正常值:玻片法2~5分钟;试管法4~12分钟。凝血时间中,大部分是内原性凝 血活酶生成所需的时间,即上述1、2阶段所需的时间,其后至纤维蛋白生成所需的时间,仅为10 15秒。因此,凝血时间反映的主要是血液内凝血因子的数量及功能是否正常,而与血小板及毛细血 管等小血管的关系较小。 凝血时间延长见于:1.较显著的Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ因子减少,如甲型、乙型和丙型血友病。2.高度的 凝血酶原减少,如严重的肝损害、阻塞性黄疸、新生儿出血等。3.纤维蛋白原减少,如先天性纤维 蛋白原缺乏症、严重肝损伤等。4.应用肝素、双香豆素等抗凝药物时。5.纤溶亢进使纤维蛋白原减 少至1~2gL以下或生成大量FDP时等。 实验对象人 、器材和用品 弹簧采血针、秒表、玻片、75%酒精棉球、%碘酒棉球、消毒干棉球、小试管3支、5m注射器 8号注射针头、试管架。 四、方法与步骤 1.玻片法 (1)用75%酒精棉消毒受试者的耳垂或指端。在消毒部位的皮肤上,用消毒后的弹簧采血针穿 刺一2^3mm深的小伤口,使血液自然流出。 (2)用干棉球轻轻拭去第一滴血,以清洁、干燥的载玻片接取继续流岀的血液一大滴(直径约 为510mm),立即开始记时 (3)于2分钟后,每隔半分钟用干燥针头挑动血液一次,直至见到纤维蛋白丝时即停止记时。 (4)记录凝血时间。即自血液流出至出现纤维蛋白丝的时间。 2.试管法 (1)取直径为8mm的试管3支,并编号 (2)在肘正中静脉处,用碘酒、酒精常规消毒皮肤,用干燥的消毒注射器从肘正中静脉采血 3ml。自血液流入针筒开始记时。 (3)除去针头,将注射器内的血液沿着管壁向每支试管内缓慢注入lml。将试管放回试管架, 并置于37℃处

实验十二 凝血时间的测定 一、目的和原理 血液离开血管数分钟后，就由流动的溶胶状态变成了不能流动的胶冻状态，这一过程称为血液 凝固，简称血凝。血液自离开血管到凝固所需的时间称为凝血时间（coagulation  time， clotting  time，CT）。由于血浆内具备了发生凝血的各种物质，所以离体后的血液，在接触带负 电荷的表面（如玻璃器材）时，即可启动凝血过程。凝血过程大体上可分为三个阶段：1.凝血酶原 激活物的生成；2.凝血酶原激活物将凝血酶原激活为凝血活酶；3.凝血活酶将纤维蛋白原转变为纤 维蛋白。凝血时间的正常值：玻片法2～5分钟；试管法4～12分钟。凝血时间中，大部分是内原性凝 血活酶生成所需的时间，即上述1、2阶段所需的时间，其后至纤维蛋白生成所需的时间，仅为10～ 15秒。因此，凝血时间反映的主要是血液内凝血因子的数量及功能是否正常，而与血小板及毛细血 管等小血管的关系较小。 凝血时间延长见于：1.较显著的Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ因子减少，如甲型、乙型和丙型血友病。2.高度的 凝血酶原减少，如严重的肝损害、阻塞性黄疸、新生儿出血等。3.纤维蛋白原减少，如先天性纤维 蛋白原缺乏症、严重肝损伤等。4.应用肝素、双香豆素等抗凝药物时。5.纤溶亢进使纤维蛋白原减 少至1～2g/L以下或生成大量FDP时等。 二、实验对象人 三、器材和用品 弹簧采血针、秒表、玻片、75%酒精棉球、4%碘酒棉球、消毒干棉球、小试管3支、5ml注射器、 8号注射针头、试管架。 四、方法与步骤 1．玻片法 (1) 用75%酒精棉消毒受试者的耳垂或指端。在消毒部位的皮肤上，用消毒后的弹簧采血针穿 刺一2~3mm深的小伤口，使血液自然流出。 (2) 用干棉球轻轻拭去第一滴血，以清洁、干燥的载玻片接取继续流出的血液一大滴（直径约 为5~10mm），立即开始记时。 (3) 于2分钟后，每隔半分钟用干燥针头挑动血液一次，直至见到纤维蛋白丝时即停止记时。 (4) 记录凝血时间。即自血液流出至出现纤维蛋白丝的时间。 2．试管法 (1) 取直径为8mm的试管3支，并编号。 (2) 在肘正中静脉处，用碘酒、酒精常规消毒皮肤，用干燥的消毒注射器从肘正中静脉采血 3ml。自血液流入针筒开始记时。 (3) 除去针头，将注射器内的血液沿着管壁向每支试管内缓慢注入1ml。将试管放回试管架， 并置于37℃处

(4)3分钟后,每隔半分钟将第一管倾斜一次,直至将试管倒置时血液不流动为止。再用同样 的方法观察第二管,第二管凝固后再观察第三管。若第三管已凝固,即以第二管的凝固时间为凝血 时间 五、注意事项 1.静脉采血时,针头要锋利,并要一针见血,尽量减少组织液的混入。 2.玻片法时,用针头挑血应沿一定的方向自血滴边缘向内轻挑,半分钟一次,切勿多方向不停 地挑动,以免破坏血凝时的纤维蛋白网状结构,造成不凝的假象。 3.倾斜试管时,动作要轻,尽量减少血液和管壁的接触,以免加速凝血 4.温度降低则血凝减缓,故应注意保温。 六、要求 测出受试者的凝血时间,掌握测定的方法,理解测定凝血时间的意义。 七、思考题 1.测定凝血时间的原理是什么? 2.对耳垂或指端酒精消毒后,为什么要用无菌干棉球擦干? 3.血液凝固和血细胞凝集的机制有何区别

(4) 3分钟后，每隔半分钟将第一管倾斜一次，直至将试管倒置时血液不流动为止。再用同样 的方法观察第二管，第二管凝固后再观察第三管。若第三管已凝固，即以第二管的凝固时间为凝血 时间。 五、注意事项 1．静脉采血时，针头要锋利，并要一针见血，尽量减少组织液的混入。 2．玻片法时，用针头挑血应沿一定的方向自血滴边缘向内轻挑，半分钟一次，切勿多方向不停 地挑动，以免破坏血凝时的纤维蛋白网状结构，造成不凝的假象。 3．倾斜试管时，动作要轻，尽量减少血液和管壁的接触，以免加速凝血。 4．温度降低则血凝减缓，故应注意保温。 六、要求 测出受试者的凝血时间，掌握测定的方法，理解测定凝血时间的意义。 七、思考题 1．测定凝血时间的原理是什么？ 2．对耳垂或指端酒精消毒后，为什么要用无菌干棉球擦干？ 3．血液凝固和血细胞凝集的机制有何区别？