延安大学：《生理学 Human Physiology》实验教学_血液实验_实验八 血红蛋白的测定

实验八血红蛋白的测定 目的原理 红细胞的主要机能是运输氧和二氧化碳,而这一机能是由血红蛋白来完成的。我国健康成年男 子的血红蛋白浓度约为每100毫升血液中1216克,成年女子约为1115克。如血中血红蛋白含量降 低,将使血液运输氧和二氧化碳的能力下降,出现一系列临床症状,故测定血红蛋白含量能辅助诊 断某些疾病。测定血红蛋白含量的方法很多,其中比较简便常用的是比色法,其原理是给一定量的 血液中加入少量的盐酸,使血红蛋白的亚铁血红素被酸化成棕褐色的高铁血红素,再用蒸馏水稀释 后与标准管进行比色,求出每100毫升血液中所含的血红蛋白量 实验的目的:学习比色法测定血红蛋白含量的原理和方法。 、实验对象人 三、器材和用品 血红蛋白计、采血针、O.lmol/L盐酸溶液、蒸馏水、75%酒精棉球。 四、步骤方法 1.熟悉仪器 本次实验所用血红蛋白计,主要包括以下三部分:(1)标准比色架,架的两侧镶有两个棕色标准玻璃 色柱。(2)血红蛋白稀释管,有方形也有圆形,两侧有刻度,一侧以克为计数单位,对侧以百分率 计,按我国的情况,以每100毫升血液内含血红蛋白14.5克为100%。(3)20立方毫米血红蛋白吸管。 此外,还有玻璃棒和滴管。 2.采血 用滴管将0.lmol/L的HCl溶液加入血红蛋白稀释管内,至10%刻度处。用75%酒精棉球消毒受试者 耳垂或指端,用消毒采血针剌破该处皮肤2~3mm,血液即刻留岀,用干棉球擦去第一滴血,待再流 出的血滴直径为2~3m时,右手持血红蛋白吸管吸取血液至20立方毫米刻度处。用棉球擦净吸管尖 周围的血液,将吸管插入血红蛋白稀释管的盐酸内,轻轻将血液吹入管底,再吸上层清液2~3次, 将吸管内残存的血液洗净。立即用玻璃棒轻轻搅动使血液与盐酸混匀,放置10分钟,使盐酸与血红 蛋白充分作用。 3.比色 将血红蛋白稀释管插入比色架两色柱中央的空格中,使无刻度的两侧面位于空格的前后方,便 于透光和比色。然后用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水,每加一滴均要搅拌,并观察颜色,直至颜 色与标准玻璃色柱相同为止。此时稀释管上液面的刻度读数即为每100毫升血液血红蛋白的克数。 4.清洁仪器 作完实验后,应将所用玻璃器皿清洗干净。稀释管用清水冲洗,吸管的冲洗同上次实验 五、注意事项

实验八 血红蛋白的测定 一、目的原理 红细胞的主要机能是运输氧和二氧化碳，而这一机能是由血红蛋白来完成的。我国健康成年男 子的血红蛋白浓度约为每100毫升血液中12~16克，成年女子约为11~15克。如血中血红蛋白含量降 低，将使血液运输氧和二氧化碳的能力下降，出现一系列临床症状，故测定血红蛋白含量能辅助诊 断某些疾病。测定血红蛋白含量的方法很多，其中比较简便常用的是比色法，其原理是给一定量的 血液中加入少量的盐酸，使血红蛋白的亚铁血红素被酸化成棕褐色的高铁血红素，再用蒸馏水稀释 后与标准管进行比色，求出每100毫升血液中所含的血红蛋白量。 实验的目的：学习比色法测定血红蛋白含量的原理和方法。 二、实验对象人 三、器材和用品 血红蛋白计、采血针、0.1mol/L盐酸溶液、蒸馏水、75%酒精棉球。 四、步骤方法 1．熟悉仪器 本次实验所用血红蛋白计，主要包括以下三部分：(1)标准比色架，架的两侧镶有两个棕色标准玻璃 色柱。(2)血红蛋白稀释管，有方形也有圆形，两侧有刻度，一侧以克为计数单位，对侧以百分率 计，按我国的情况，以每100毫升血液内含血红蛋白14.5克为100%。(3)20立方毫米血红蛋白吸管。 此外，还有玻璃棒和滴管。 2．采血 用滴管将0.1mol/L的HCl溶液加入血红蛋白稀释管内，至10%刻度处。用75%酒精棉球消毒受试者 耳垂或指端，用消毒采血针刺破该处皮肤2～3mm，血液即刻留出，用干棉球擦去第一滴血，待再流 出的血滴直径为2～3mm时，右手持血红蛋白吸管吸取血液至20立方毫米刻度处。用棉球擦净吸管尖 周围的血液，将吸管插入血红蛋白稀释管的盐酸内，轻轻将血液吹入管底，再吸上层清液2～3次， 将吸管内残存的血液洗净。立即用玻璃棒轻轻搅动使血液与盐酸混匀，放置10分钟，使盐酸与血红 蛋白充分作用。 3．比色 将血红蛋白稀释管插入比色架两色柱中央的空格中，使无刻度的两侧面位于空格的前后方，便 于透光和比色。然后用滴管向稀释管内逐滴加入蒸馏水，每加一滴均要搅拌，并观察颜色，直至颜 色与标准玻璃色柱相同为止。此时稀释管上液面的刻度读数即为每100毫升血液血红蛋白的克数。 4．清洁仪器 作完实验后，应将所用玻璃器皿清洗干净。稀释管用清水冲洗，吸管的冲洗同上次实验。 五、注意事项

蒸馏水须逐滴加入,随时比色,以免稀释过量。每次比色时,须将搅拌用的玻璃棒取岀,以免 影响比色。 六、要求 1.掌握比色法测定血红蛋白含量的原理和方法。 2.了解测定血红蛋白含量的意义 七、思考题 1.测定血红蛋白的原理如何?血红蛋白具有什么功能? 2.血红蛋白含量的变化和红细胞数目的增减是否一定呈线性平行关系?为什么? 3.测定血红蛋白含量时,可能会出现哪些问题?原因何在?

蒸馏水须逐滴加入，随时比色，以免稀释过量。每次比色时，须将搅拌用的玻璃棒取出，以免 影响比色。 六、要求 1．掌握比色法测定血红蛋白含量的原理和方法。 2．了解测定血红蛋白含量的意义。 七、思考题 1．测定血红蛋白的原理如何？血红蛋白具有什么功能？ 2．血红蛋白含量的变化和红细胞数目的增减是否一定呈线性平行关系？为什么？ 3．测定血红蛋白含量时，可能会出现哪些问题？原因何在？