《生命科学导论实验》课程教学资源（讲义）普通光学显微镜的构造及其操作规范

普通光学显微镜的构造及其操作规范

普通光学显微镜的构造 及其操作规范

掌握显微镜的构造及功能，熟练使用光学显微镜。了解显微镜使用的基本要求、注意事项及一般维护方法（列入实验习惯成绩测评）

n 掌握显微镜的构造及功能，熟练使用光学 显微镜。 n 了解显微镜使用的基本要求、注意事项及 一般维护方法 （列入实验习惯成绩测评）

显微镜的基本结构目镜光学放大系统物镜转换器物镜载物台玻片夹机械柔统聚光器聚光照明系统粗细准焦螺旋光源

物镜 目镜 粗细准焦螺旋 载物台 玻片夹 聚光器 光源 光学放大系统 聚光照明系统 机械系统 物镜转换器 显微镜的基本结构

目镜放大倍数：10 X物镜放大倍数：4 X（红色低倍观察10 X冬（黄色）低倍观察20 X（绿色）高倍观察40X（蓝色）高倍观察（白色）100×油镜观察

n 目镜放大倍数：10 × n 物镜放大倍数： 4 × 低倍观察（红色） 10 × 低倍观察（黄色） 20 × 高倍观察（绿色） 40 × 高倍观察（蓝色） 100 × 油镜观察 （白色）

付透镜SPlan100种类与放大率SPlan10油漫1.25oll0.30160/0.17盖玻片标准厚度（mm）镜筒长度（mm）数值孔径160%工作距离（mm）bbtoocom在物镜上有（N.A）数值孔怪的标志，它反应该镜头分辨力的大小其数字越大，表示分辨率越高。最大分辨率：肉眼0.2mm；光镜0.2um；电镜0.2nm

数值孔径 在物镜上有(N.A.)数值孔径的标志,它反应该镜头分辨 力的大小,其数字越大,表示分辨率越高。 最大分辨率：肉眼 0.2 mm;光镜 0.2µm;电镜 0.2 nm

显微镜的总放大倍率就是物镜放大倍率和目镜放大倍率的乘积。放大倍率是指直线尺寸的放大比，而不是面积比。因此普通光学显微镜的最大有效倍数为10X100

n 显微镜的总放大倍率就是物镜放大倍率和 目镜放大倍率的乘积。放大倍率是指直线 尺寸的放大比，而不是面积比。 n 因此普通光学显微镜的最大有效倍数为 10X100

聚光镜聚光镜升降旋孔径光廊纽视场光闻孔径光阑的作用是使图像的分辩率、反差和焦深处在最佳状况。通常是用物镜的数值孔径来调节聚光镜的孔径光阑。视场光阑是根据物镜的倍率给予不同直径的光束面积，在显微摄影时，起着增减影像反差的作用

聚光镜 聚光镜 升降旋 钮 孔径光阑 视场光阑 孔径光阑的作用是使图像的分辨率、反差和焦深处在最佳状况。通常是用 物镜的数值孔径来调节聚光镜的孔径光阑。 视场光阑是根据物镜的倍率给予不同直径的光束面积，在显微摄影时，起 着增减影像反差的作用

孔怪光栏调节50100mmN. A聚= (0. 6-0. 8) N. A物孔径光阑的位置是在物镜数值孔径的60%-80%之间。物镜后焦点平面孔径光阑OLYMPUSAodenat Adromust1a2121.0.0.8.0.6.0460~80%100%

孔径光栏调节 N.A聚=(0.6-0.8)N.A物 孔径光阑的位置是在物镜数值 孔径的60%-80%之间

孔径光阑与显微镜分辨率视野很亮，杂散光和炫光很多对比度差，些细节丢失一调到物镜数值孔径的2/3至0显微镜的分辨率和反差4/5时，获得最佳的配合，对比度好，细节较丰富O远小于物镜数值孔径时，视野暗，成像细节不清晰。对染色浅、对比度低的标本进行观察和显微照相时，最好把孔怪光阑关得再小一些；而对于那些染色深、对比度高的标本进行观察和显微照相时则将孔怪光阑开得再大一些为好

100% 70% 30% 孔径光阑与显微镜分辨率 n 视野很亮，杂散光和炫光很多， 对比度差，一些细节丢失 n 调到物镜数值孔径的2/3 至 4/5时，显微镜的分辨率和反差 获得最佳的配合，对比度好，细 节较丰富 n 远小于物镜数值孔径时，视 野暗，成像细节不清晰。 对染色浅、对比度低的标本进行观察和显微照相时，最好把孔径光阑关得 再小一些；而对于那些染色深、对比度高的标本进行观察和显微照相时， 则将孔径光阑开得再大一些为好

孔怪光栏的运用

孔 径 光 栏 的 运 用