《环境分子生物学》课程教学课件（讲稿）第5章 环境分子生物学常用技术 5-4 克隆-基因重组 Gene Engineering

基因工程GeneEngineering

1 基 因 工 程 Gene Engineering

第一节.概述第三节.基因工程工具酶第四节.基因工程载体第五节, 目的基因的获得第六节。目的基因导入受体细胞第七节.重组休的沸选第节.应用

2 第一节. 概述 第三节. 基因工程工具酶 第四节. 基因工程载体 第五节. 目的基因的获得 第六节. 目的基因导入受体细胞 第七节. 重组体的筛选 第八节. 应用

概述第一节

3 第一节 概 述

第一节.概述基因工程的内容（1)基图工程将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制，转录，翻译表达的操作

4 第一节. 概述 基因工程的内容 （1） 基因工程：将外源基因通过体外重组后 导入受体细胞内，使这个基因能在受体细 胞内复制，转录，翻译表达的操作

第一节概述基因工程的内容(2)主要内容：带有目的基因的DNA片段的获取在体外，将带有目的基因的DNA片段连接到载体上，形成重组DNA分子。重组DNA分子导入受体细胞（亦称宿主细胞或寄主细胞)。带有重组体的细胞扩增，获得大量的细胞繁殖群体重组体的筛选

5 第一节. 概述 基因工程的内容 （2） 主要内容：  带有目的基因的DNA片段的获取  在体外，将带有目的基因的DNA片段连接到载体 上，形成重组DNA分子。  重组DNA分子导入受体细胞(亦称宿主细胞或寄主 细胞)。  带有重组体的细胞扩增，获得大量的细胞繁殖群体。  重组体的筛选

第一节概述基因工程的内容（3)基因工程的特征强调确定的DNA小片断在新的寄主细胞中进行扩增的事实。强调外源核酸（几乎总是DNA分子）在另一种不同寄主生物细胞中的繁殖。跨越天然物种屏障，创造自然界原来不存在的新的生物类型

6 第一节. 概述 基因工程的内容 （3） 基因工程的特征：  强调确定的DNA小片断在新的寄主细胞中进行扩 增的事实。  强调外源核酸（几乎总是DNA分子）在另一种不 同寄主生物细胞中的繁殖。 跨越天然物种屏障，创造自然界原来不存在的新 的生物类型

第一节概述克隆载体限制性内限制性内切酵酶解切酶酶解基因重组的一般步骤产相容末端目的基因连接转化宿主细胞并筛选出含有重组子的克降大量培养这些克隆，检测表达产物

7 第一节. 概述 基因重组的一般步骤

第一节.概述基因工程的内容 (4)基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术基因工程的实施至少要有四个必要条件：工具酶基因载体受体细胞

8 第一节. 概述 基因工程的内容 （4） 基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术， 基因工程的实施至少要有四个必要条件：  工具酶  基因  载体  受体细胞

第一节概述基因工程的内容（5)基因工程的出现，给社会发展带来了深刻的的影响，迫使工业、农业、医疗卫生事业及生物学本身都面临一场空前的革命。其影响之深远、潜力之巨大，在目前是无法估量的

9 第一节. 概述 基因工程的内容 （5） 基因工程的出现，给社会发展带来了深刻的的影 响，迫使工业、农业、医疗卫生事业及生物学本身， 都面临一场空前的革命。其影响之深远、潜力之巨 大，在目前是无法估量的

第一节概述DNA重组技术的意义使得生物技术过程中生物转化环节的优化更为有效制造一些具有优良性状的生物（高效菌株，不仅仅是分离）原核生物及真核生物细胞都可以作为生物工厂来生产胰岛素、干扰素、生长激素、病毒抗原等大量外源蛋白简化许多有用化合物和大分子的生产过程简化新药的开发与检测系统10

10 DNA重组技术的意义  使得生物技术过程中生物转化环节的优化更为有效  制造一些具有优良性状的生物（高效菌株，不仅仅是分离）  原核生物及真核生物细胞都可以作为生物工厂来生产胰岛 素、干扰素、生长激素、病毒抗原等大量外源蛋白  简化许多有用化合物和大分子的生产过程  简化新药的开发与检测系统 第一节. 概述