重庆医科大学：基础医学实验教学课件（PPT讲稿）实验七 临床微生物学技术（一）

()临床微生物技术一细菌检验的基本技术

临床微生物技术（一）-细菌检验 的基本技术

[实验类型]基本实验方法[目的要求]1.掌握细菌基础培养基制备所需器材的准备和灭菌2.掌握细菌基础培养基制备的方法和技巧3.掌握在各种细菌培养基上的细菌接种方法

[实验类型] 基本实验方法 [目的要求] 1.掌握细菌基础培养基制备所需器材的准备和灭菌 2.掌握细菌基础培养基制备的方法和技巧 3.掌握在各种细菌培养基上的细菌接种方法

一、制备肉膏汤、半固体、琼脂斜面、普通平板1.肉膏汤（液体培养基）：2ml/支根据培养基说明进行配制例如：营养肉汤粉末（含牛肉浸膏+蛋白陈+NaCI）+去离子水加热熔化，配制成1.8%的溶液调节pH7.4-7.6分装，高压蒸汽灭菌，冷却2ml/支2.半固体培养基：(0. 3%)分装灭菌肉膏汤+0.1%~0.5%琼脂3ml/支3.琼脂斜面培养基：肉膏汤+2%琼脂分装灭菌后倾斜待凝10ml/板4.普通琼脂平板：肉膏汤+2%琼脂消毒灭菌，用时倾倒“1.8%”为质量体积百分比，表示100ml水中加入1.8g肉汤粉末。添加量根据实际配制量进行计算，如要配制500ml液体培养基需加粉末9g

1.肉膏汤（液体培养基）： 2ml/支 根据培养基说明进行配制 例如： 营养肉汤粉末（含牛肉浸膏+蛋白胨+NaCl）+去离子水 加热 熔化，配制成1.8%的溶液 调节pH 7.4-7.6分装，高压蒸汽灭菌，冷却。 2.半固体培养基 ： 2ml/支 肉膏汤 + 0.1%～0.5%琼脂（0.3%） 分装灭菌 3.琼脂斜面培养基： 3ml/支 肉膏汤+2%琼脂 分装灭菌后倾斜待凝 4.普通琼脂平板 ： 10ml/板 肉膏汤+2%琼脂 消毒灭菌，用时倾倒 一、制备肉膏汤、半固体、琼脂斜面、普通平板 “1.8%” 为质量体积百分比，表示100ml水中加入1.8g肉汤粉末。添加量根 据实际配制量进行计算，如要配制500ml液体培养基需加粉末9g

[分组]4-6人/组备注：每组做一种培养基，计算所需用量。每人需肉膏汤培养基，半固体培养基各1支（2ml）普通琼脂斜面1支（3ml），普通琼脂平板（10ml），用于后续实验时倾倒

[分组] 4-6人/组 备注：每组做一种培养基,计算所需用量。 每人需肉膏汤培养基， 半固体培养基各1支（2ml）， 普通琼脂斜面1支（3ml）， 普通琼脂平板（10ml），用于后续实验时倾倒

每只用量液体培养基培养基准备量人数（人）用量（ml）(ml)总准备量液体培2173450400*养基半固体/250*1734培养基斜面培370*/1751养基固体培11017200*170养基制备培养基，添加琼脂的量要按照准备量来进行计算

培养基 每只用量 （ml） 人数（人） 用量（ml） 准备量 液体培养基 总准备量 液体培 养基 2 17 34 50 400* 半固体 培养基 2 17 34 50* / 斜面培 养基 3 17 51 70* / 固体培 养基 10 17 170 200* / *制备培养基，添加琼脂的量要按照准备量来进行计算

二细菌培养基上的细菌接种方法1.看录像：细菌的人工接种（复习）。2. 细菌接种：菌种为一一大肠杆菌，枯草杆菌。(1)普通琼脂平板(2)琼脂斜面(3)半固体培养基(4)液体培养基3.需氧培养法35-37C.18-24h

二、细菌培养基上的细菌接种方法 1. 看录像：细菌的人工接种（复习）。 2. 细菌接种: 菌种为-大肠杆菌，枯草杆菌。 （1）普通琼脂平板 （2）琼脂斜面 （3）半固体培养基 （4）液体培养基 3.需氧培养法 35-37℃，18-24h

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作业1.记录培养基的制备过程2.记录接种方法

作业 1. 记录培养基的制备过程 2. 记录接种方法