重庆医科大学：基础医学实验教学课件（PPT讲稿）PEG法检测循环免疫复合物

实验六PEG法检测循环免疫复合物(CIC)

实验六 PEG法检测 循环免疫复合物（CIC）

【实验原理）·低浓度（3～5%)的聚乙二醇（PEG）能选择性沉淀免疫复合物。在受检血清中加入PEG使最终浓度为3.75%，可将血清中免疫复合物沉淀下来，需用分光光度计测定吸光度值(A)表示其相对量。本法简便易行，国内己广泛应用作为检测循环免疫复合物的初（粗）筛试验

【实验原理】 •低浓度（3~5%)的聚乙二醇（PEG) 能选择 性沉淀免疫复合物。在受检血清中加入PEG， 使最终浓度为3.75%，可将血清中免疫复合 物沉淀下来，需用分光光度计测定吸光度值 (A)表示其相对量。 •本法简便易行，国内己广泛应用作为检测循 环免疫复合物的初（粗）筛试验

试剂与材料1、0.1mol/L硼酸缓冲液：称取硼砂0.4g，硼酸0.51g溶于100ml蒸馏水中，调PH至8.6。2、4.166%PEG溶液：用硼酸缓冲液配制。PEG的分子量为6000。3、受检血清，试管，吸管，721分光光度计

【试剂与材料】 1、0.1mol/L硼酸缓冲液： 称取硼砂0.4g，硼酸0.51g， 溶于100ml蒸馏水中，调PH至8.6。 2、4.166%PEG溶液：用硼酸缓冲液配制。 PEG的分子量为6000。 3、受检血清，试管，吸管，721分光光度计

实验方法1.吸待检血清0.2ml，用硼酸缓冲液0.4ml稀释（血清稀释3倍）。2.分对照管和测定管：对照管：硼酸缓冲液夜2ml+稀释血清0.22ml：测定管：4.166%PEG2m1+稀释血清0.22ml（此时PEG最终浓度为3.75%）3.混匀后两管均放4℃冰箱1h后取出，室温放置10min。4.用7210.5×1cm比色杯，检测测定管A45onm值。(对照管调零）

实验方法 1.吸待检血清0.2ml，用硼酸缓冲液0.4ml稀释（血清 稀释3倍）。 2.分对照管和测定管： 对照管：硼酸缓冲液 2ml+稀释血清0.22ml； 测定管：4.166％PEG 2ml+稀释血清0.22ml （此时PEG最终浓度为3.75％） 3.混匀后两管均放4℃冰箱1h后取出，室温放置10min。 4.用721 0.5×1cm比色杯，检测测定管A450nm值。 （对照管调零）

结果判断待测血清浊度值(测定管A一对照管A)×10000一正常值<510

结果判断 ▲待测血清浊度值 ＝（测定管A－对照管A)×10000 ▲正常值<510

实验讨论·注意在本试验中要求的PEG终浓度为3.75%。·受检查血清为何要一定保持新鲜，放冰箱保存不得超过一周（因为即使没有污染，也因血清中聚合IgG的形成而出现假阳性）

实验讨论 •注意在本试验中要求的PEG终浓度为3.75％。 •受检查血清为何要一定保持新鲜，放冰箱保 存不得超过一周（因为即使没有污染，也因 血清中聚合IgG的形成而出现假阳性）