《有机与分析化学》荧光分光光度法

荧光分光光度法 flourescence 简介: 荧光发光的原理 量子效率: 四.荧光发光光谱仪的构造 五.荧光的定量分析:◆ 六.荧光光度计的发展

荧光分光光度法 Flourescence 一.简 介: 二.荧光发光的原理: 三.量子效率: 四.荧光发光光谱仪的构造： 五.荧光的定量分析： 六.荧光光度计的发展

简介 1和UⅣ异同点 2荧光分析法主要 应用范围与常用方法 3优势

简介 1.和UV异同点 2.荧光分析法主要 应用范围与常用方法 3.优势

1.与UV异同点 )构造与UV很相似 属于分光光度法,光源单色器等 2)组件的布置稍有不同 荧光采用激发光和发射光 成直角的直角光路 3原理也不一样这在后面介绍

1.与UV异同点 1)构造与UV很相似. 属于分光光度法,光源.单色器等 2)组件的布置稍有不同 荧光采用激发光和发射光 成直角的直角光路., 3)原理也不一样.这在后面介绍

2荧光分析法主要应用范围 1)生物技术的分析,免疫技术的分 析,如DNA、抗体、抗原等; 2)痕量元素的分析,如70多种无 机元素; 3)间接测定众多的有机物,包括 药物

2.荧光分析法主要应用范围 1）生物技术的分析,免疫技术的分 析,如DNA、抗体、抗原等; 2）痕量元素的分析，如70多种无 机元素； 3）间接测定众多的有机物，包括 药物

荧光分析一般分为三种: 1X射线荧光分析(X射线) 2原子荧光分析(激光) 3分子荧光分析(汞弧灯)

荧光分析一般分为三种： 1.X射线荧光分析（X射线） 2.原子荧光分析（激光） 3.分子荧光分析（汞弧灯）

3优势 )灵敏度高:比UV高2~~3个 数量级 2)信息多:激发分光光谱(信 息同于UV)、发射光光谱的发 光强度、发光寿命、量子效率 荧光偏振等多种信息,定性更好;

3.优势 1）灵敏度高：比UV高2~~3个 数量级. 2）信息多: 激发分光光谱（信 息同于UV）、发射光光谱的发 光强度、发光寿命、量子效率、 荧光偏振等多种信息,定性更好;

3)工作曲线的线性范围宽(定量 更准)应用范围也广微量元素的 分析、医药、环境石油工业等能 直接或间接分析众多的有机物 4)专一性强:许多物质的测定采 用间接法 伯乐公司的 Labeled dna的荧光标 记物 Labeling kits

3）工作曲线的线性范围宽（定量 更准） 应用范围也广微量元素的 分析、医药、环境,石油工业等能 直接或间接分析众多的有机物 4）专一性强：许多物质的测定采 用间接法. 伯乐公司的Labeled DNA的荧光标 记物 Labeling kits

荧光发光的原理 激发和发射过程 1.激发过程: ①基态:能量最低状态S ②激发态:电子处于反键轨道上为激 发态 最有意义的为π→π*和n→>π*过程 电子激发过程很快,1015S, 不稳定

荧光发光的原理: 激发和发射过程 1.激发过程： ①基态：能量最低状态 S0 ②激发态:电子处于反键轨道上为激 发态 最有意义的为π→π*和n→π*过程 电子激发过程很快，10-15 S， 不稳定

2.发射过程 当激发态在返回基态时,伴有光子 的辐射称为发光过程,又称发射过 程 荧光和磷光均为此种光致发光 过程。(又称冷光) 实际从激发态回到基态过程充 满竞争

2.发射过程 当激发态在返回基态时，伴有光子 的辐射称为发光过程，又称发射过 程。 荧光和磷光均为此种光致发光 过程。(又称冷光) 实际从激发态回到基态过程充 满竞争

( jablonski)杰不朗斯基的图解 S=0 ISC T

(jablonskii)杰不朗斯基的图解