《改变生活的生物技术》课程教学资源（阅读材料）引物原位标记技术与染色体疾病的产前诊断

引物原位标记技术( PRINS)与染色体疾病的产前诊断 杨陈筠13301030049 PRINS的原理 PRINS技术的基本原理是在保持组织细胞形态结构的基础上,依赖细胞膜和 核膜的通透性,在细胞胞浆或核中进行原位标记特定DNA或mRMA序列。以靶DNA 或皿RNA序列为模板,将含有寡核苷酸引物(未标记的探针)、生物素或地髙辛等 非同位素标记的脱氧核苷酸以及适量的DNA聚合酶或者RMA逆转录酶加到玻片 上,在退火温度下已变性的DMA或mRNA与引物特异性结合并延伸,已标记的脱 氧核苷酸掺入新合成的链中。通过相应的检测系统便可将已被标记的靶基因检测 出来并显示其引物延伸的位置。 PRINS反应所需的引物一般按待测的靶基因的核 苷酸序列设计而成,所以引物一般具有特异性

引物原位标记技术（PRINS)与染色体疾病的产前诊断 杨陈筠 13301030049 PRINS 的原理 PRINS 技术的基本原理是在保持组织细胞形态结构的基础上，依赖细胞膜和 核膜的通透性，在细胞胞浆或核中进行原位标记特定 DNA 或 mRNA 序列。以靶 DNA 或 mRNA 序列为模板，将含有寡核苷酸引物(未标记的探针)、生物素或地高辛等 非同位素标记的脱氧核苷酸以及适量的 DNA 聚合酶或者 RNA 逆转录酶加到玻片 上，在退火温度下已变性的 DNA 或 mRNA 与引物特异性结合并延伸，已标记的脱 氧核苷酸掺入新合成的链中。通过相应的检测系统便可将已被标记的靶基因检测 出来并显示其引物延伸的位置。PRINS 反应所需的引物一般按待测的靶基因的核 苷酸序列设计而成，所以引物一般具有特异性

在诊断染色体病中的作用 染色体病包括染色体数目异常和结构畸变。染色体数目异常占新生儿出生缺 陷的95%以上,其中最常见的是21三倍体。Koch等首先于1995年用 PRINS方 法标记了除6、19、20号以外的全部人类染色体,检出了单倍体、三倍体、四倍 体等染色体病。2003年,德国的 Mennickek比较了 PRINS和Fish两种方法在产 前诊断18号染色体数目异常,结果发现结果相似,正确率均大于95%但 PRINS 更快速,简便。2001年,我国学者刘福民等人用 PRINS方法标记了绒毛细胞问 期核21号染色体,诊断21号染色体数目异常获得成功。以后我国又有学者相继 检出了18三倍体以及X、Y染色体数目异常。以上研究均证实, PRINS方法在产 前诊断染色体数目异常方面具有快速、准确、简便的特点。染色体结构畸变包括 染色体缺失、易位等结构重排。 PRINS技术通过硏究染色体显带、基因定位及核 苷酸顺序来诊断染色体结构畸变。 Pellston等用 PRINS技术检测到13号染色体 上发生的结构异常,直接检测到了罗伯逊易位和环状畸变,这是其他传统的细胞 遗传学技术办不到的

在诊断染色体病中的作用 染色体病包括染色体数目异常和结构畸变。染色体数目异常占新生儿出生缺 陷的 95％以上，其中最常见的是 21 三倍体。Koch 等首先于 1995 年用 PRINS 方 法标记了除 6、19、20 号以外的全部人类染色体，检出了单倍体、三倍体、四倍 体等染色体病。2003 年，德国的 MennickeK 比较了 PRINS 和 Fish 两种方法在产 前诊断 18 号染色体数目异常，结果发现结果相似，正确率均大于 95％，但 PRINS 更快速，简便。2001 年，我国学者刘福民等人用 PRINS 方法标记了绒毛细胞问 期核 21 号染色体，诊断 21 号染色体数目异常获得成功。以后我国又有学者相继 检出了 18 三倍体以及 X、Y 染色体数目异常。以上研究均证实，PRINS 方法在产 前诊断染色体数目异常方面具有快速、准确、简便的特点。染色体结构畸变包括 染色体缺失、易位等结构重排。PRINS 技术通过研究染色体显带、基因定位及核 苷酸顺序来诊断染色体结构畸变。Pellstor 等用 PRINS 技术检测到 13 号染色体 上发生的结构异常，直接检测到了罗伯逊易位和环状畸变，这是其他传统的细胞 遗传学技术办不到的