贵州中医药大学：《中药制剂分析实验》课程教学课件（PPT讲稿）淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量测定实验

羊药材中淫羊藿苷的含量测定实验基础实验室

淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量测定实验 基础实验室

实验名称淫羊药材中淫羊藿的含量测定自的要求1.掌握高效液相色谱仪的操作步骤2.室掌握外标工作曲线法测定淫羊藿药材中淫羊藿苷含量的方法。3.了解淫羊藿药材中淫羊苷成分的提取步骤和方法

实验名称 淫羊藿药材中淫羊藿苷的含量测定 一、目的要求 1．掌握高效液相色谱仪的操作步骤。 2．掌握外标工作曲线法测定淫羊藿药材 中淫羊藿苷含量的方法。 3．了解淫羊藿药材中淫羊藿苷成分的提 取步骤和方法

二、实验原理本品为小檗科植物淫羊藿的干燥地上部分，有效成分主要为淫羊藿(C33H40015)2005年等黄酮类化合物。照《中国药典》版一部淫羊藿项下规定，采用高效液相色谱法在270nm波长下检测，计算，即得。本品叶片按干燥品计算，含淫羊藿苷不得少于0.5%

二、实验原理 本品为小檗科植物淫羊藿的干燥地上部 分，有效成分主要为淫羊藿（C33H40O15） 等黄酮类化合物。照《中国药典》2005年 版一部淫羊藿项下规定，采用高效液相色 谱法在270nm波长下检测，计算，即得。 本品叶片按干燥品计算，含淫羊藿苷不得 少于0.5％

三、仪器及试剂1.仪器岛津LC-20A高效液相色谱仪，紫外检测器，超声波清洗器，具塞锥形(50ml）等。移液管(10ml)（20ml），量瓶2. 试剂（色谱稀乙醇，乙腈（色谱纯），甲醇纯），纯净水

三、仪器及试剂 1．仪器 岛津LC-20A高效液相色谱仪，紫外检测 器，超声波清洗器，具塞锥形（50ml）， 移液管（20ml），量瓶（10ml）等。 2. 试剂 稀乙醇，乙腈（色谱纯），甲醇（色谱 纯），纯净水

四、实验内容及步骤色谱条件色谱柱：Diamonsil（钻石）-C18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈一水(28：72）；柱温：25℃；检测波长：270 nm；流速：1.0mL·min-1；进样体积：10μl

四、实验内容及步骤 1． 色谱条件 色谱柱：Diamonsil(钻石)- C18（4.6mm×250mm，5µm）；流动相：乙腈 一水(28：72)；柱温：25℃；检测波长： 270 nm；流速：1.0 mL ·min-1；进样体积： 10µl

2.对照品溶液的制备精密称取淫羊苷对照品，加甲醇溶解并制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液

2．对照品溶液的制备 精密称取淫羊藿苷对照品，加甲醇溶解 并制成每1ml含 0.1mg的溶液，作为对照 品溶液

3.工作曲线的绘制(0.1106精密吸取淫羊苷对照品溶液mgml-1）2，4，6，8，10ml分别置于10ml容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀，各取10μl进样，测定峰面积。分别重复进样3次，以其峰面积平均值为纵坐标，其对应的对照品溶液浓度为横坐标，进行回归计算，得到淫羊藿苷的回归方程和相关系数，线性范围

3．工作曲线的绘制 精密吸取淫羊藿苷对照品溶液（0.1106 mg·ml-1）2，4，6，8，10 ml分别置于10ml容量 瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀，各取10µl进 样，测定峰面积。分别重复进样3次，以其峰面 积平均值为纵坐标，其对应的对照品溶液浓度 为横坐标，进行回归计算，得到淫羊藿苷的回 归方程和相关系数 ，线性范围

4.供试品溶液的制备取样品粉末（药材阴干后，粉碎过40目筛）约0.4g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，精密加稀乙醇20mL，称定重量，超声提取1h，放置至室温，再称定重量，用稀乙醇补足损失的重量，摇匀，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得

4．供试品溶液的制备 取样品粉末（药材阴干后，粉碎过40 目筛）约0.4g，精密称定，置50 mL具塞 锥形瓶中，精密加稀乙醇20 mL，称定重 量，超声提取1h，放置至室温，再称定重 量，用稀乙醇补足损失的重量，摇匀，滤 过，弃去初滤液，取续滤液，即得

5.测定法精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得

精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 10µl，注入液相色谱仪，测定，即得。 5．测定法

五、注意事项取样量要准确12.仪器操作时应严格按照操作规程进行

五、注意事项 1. 取样量要准确。 2. 仪器操作时应严格按照操作规程进行