《基因工程》课程PPT教学课件（讲稿）DNA重排的检测方法

DNA重排的检测方法 马荣高方远康海歧

DNA重排的检测方法 马欣荣 高方远 康海歧

、形态学观察 二、细胞遗传学 如:色体桉型分析、棨色体显带等 分子细胞遗传学 如:荧光原位杂交 四、分子生物学 如: Southern杂交,PCR及相关技术等

一、形态学观察 二、细胞遗传学 如：染色体核型分析、染色体显带等 三、分子细胞遗传学 如：荧光原位杂交 四、分子生物学 如： Southern杂交，PCR及相关技术等

B恋学观察 例子: 上个世纪40年代科学家B, McClintock 观禀研究玉米籽粒和叶子时发现有颜色 变化。这种颜色变化是由遗传结构的基 本改变引起的,从而导致转廛子的发现。 ·肿瘤细胞与正常细胞 肿瘤细胞中基因量排现象非常普遍。遗 传结构的改变引起表型的改变。因此从 形忞学上可以鉴定肿瘤

一、形态学观察 例子： • 上个世纪40年代科学家B．McClintock 观察研究玉米籽粒和叶子时发现有颜色 变化。 这种颜色变化是由遗传结构的基 本改变引起的，从而导致转座子的发现。 • 肿瘤细胞与正常细胞 肿瘤细胞中基因重排现象非常普遍，遗 传结构的改变引起表型的改变。因此从 形态学上可以鉴定肿瘤

二、细胞遗传学 染色体核型分析、色体显带 一个物种的棨色体核型及带型是稳定的 1.染色体核型分析:观中期染色体,初步 分析染色体有无较大片段的缺失、断裂 易位、及附加 常规核型分析 荧光桉型分析 光谱核型分析( Spectral karyotyping,SKY

二、细胞遗传学 染色体核型分析、染色体显带 一个物种的染色体核型及带型是稳定的 1. 染色体核型分析：观察中期染色体，初步 分析染色体有无较大片段的缺失、断裂、 易位、及附加 • 常规核型分析 • 荧光核型分析 • 光谱核型分析(Spectral karyotyping, SKY)

光谱核型分析原理( Spectral karyotyping,SKY) 1996年 Schoch等首次描迷了SKY技术。 应用5种荧光素同时标记24条人染色体。制成 染色体涂染探针,应用 Fourier光谱仪。CC成 像和荧光显微镜选行检测分析。经讣犷成像处 理,46条染色体形成具有不同颜色的核型影像 可用以分析各种染色体异常。 优勢 ·特异性和分辨率比传统的显带技术高,它 可以检测到1.5mb碱基的转位 一次杂交即可分辨人的24条染色体

光谱核型分析原理(Spectral karyotyping, SKY) 1996 年 Schroch等首次描述了SKY技术。 应用5种荧光素同时标记24条人染色体，制成 染色体涂染探针，应用Fourier光谱仪，CC成 像和荧光显微镜进行检测分析，经计算成像处 理，46条染色体形成具有不同颜色的核型影像, 可用以分析各种染色体异常。 优势： • 特异性和分辨率比传统的显带技术高，它 可以检测到 1.5mb 碱基的转位 • 一次杂交即可分辨人的24条染色体

HI ll a91 1112 10 20 2122 X Y 人染色体光谱核型分析

人染色体光谱核型分析

13 I mart mar2 mar3 mar4 mar5mar6 乳腺癌细胞染色体复杂的畸变

乳腺癌细胞染色体复杂的畸变

2.染色体显带技术 C- banding主要染异染色质 R- banding与C- banding相反,主要染常 染色质区域 G- banding是 Giemsa染色结果,产生深 浅不同的条带 Q- banding是用喹丫因( quinacrine)染 色得到的荧光条带,带型与G带相似

2.染色体显带技术： • C-banding 主要染异染色质 • R-banding 与C-banding 相反，主要染常 染色质区域 • G-banding 是Giemsa 染色结果，产生深 浅不同的条带 • Q-banding 是用喹丫因（quinacrine）染 色得到的荧光条带，带型与G带相似

"" G-带 C.正常染色体 a.末端缺失 d.末端倒 b.末端单向易位 e.着丝粒周倒

G-带 c. 正常染色体 a. 末端缺失 d. 末端倒位 b. 末端单向易位 e. 着丝粒周倒位

器 1011 9 10 11 G-带显示人急性骨髓白血病异常染色体 9、10、11染色体间易位。右为异常染色体

G－带显示人急性骨髓白血病异常染色体 9、10、11染色体间易位，右为异常染色体