绍兴文理学院：《细胞生物学》课程教学资源（教程讲稿）第二章 细胞生物学实验技术

http://www.cella.cn 第二章 细胞生物学实验技术 se METHODS AND TECHNIQUES D72008

http://www.cella.cn 第二章 细胞生物学实验技术 METHODS AND TECHNIQUES

本章内容提要 ·第一节显微技术 一、光学显微镜 ·二、电子显微镜 ·三、显微操作技术 。 第二节生物化学与分子生物学技术 ·第三节细胞分离技术 第四节细胞培养与细胞杂交 Dr Tian 2008

本章内容提要 • 第一节 显微技术 • 一、光学显微镜 • 二、电子显微镜 • 三、显微操作技术 • 第二节 生物化学与分子生物学技术 • 第三节 细胞分离技术 • 第四节 细胞培养与细胞杂交

http://www.cella.cn 第一节显微技术 光学显微镜与电子显微镜 D72008

http://www.cella.cn 第一节 显微技术 光学显微镜与电子显微镜

http://www.cella.cn 一、光学显微镜 Dr Tian 2008

http://www.cella.cn —、光学显微镜

(一)普通光学显微镜 ·1.构成： ①照明系统 ②光学放大系统 ③机械装置 2.原理：经物镜形成倒立实像，经目镜放大成虚像。 D72008

（一）普通光学显微镜 • 1. 构成： • ①照明系统 • ②光学放大系统 • ③机械装置 • 2. 原理：经物镜形成倒立实像，经目镜放大成虚像

Structure of Microscope 胶片平面 照相机接口 取景器 光学传感器阵列 ∠< PLI投影镜头 眼点位置V 物镜 载物台运动控制旋钮 同轴粗微调旋钮 聚光器 视场光阑调节环 灯室聚光镜 集光镜 漫射镜 卤素灯 Dm72008

Structure of Microscope

eye eyepiece (ocular) Light Pathway of Microscope objective specimen condenser light (wm☐ source /1I1I\ D708

Light Pathway of Microscope

·3.分辨力：指分辨物体最小间隔的能力。 ·光学显微镜的分辨力R=0.61入/N.A. -其中λ为入射光线波长： -N.A.为镜口率=n sina/2; -n=介质折射率； α=镜口角（样品对物镜镜口的张角） Dm72008

• 3. 分辨力：指分辨物体最小间隔的能力。 • 光学显微镜的分辨力 R=0.61λ/N．A． – 其中λ为入射光线波长； – N．A．为镜口率 ＝ｎsinα/2； – n=介质折射率； – α=镜口角（样品对物镜镜口的张角）

表一、几种介质的折射率 介质 空气 水 香柏油 a溴萘 折射率 1 1.33 1.515 1.66 D72008

表一、几种介质的折射率 介质 空气 水 香柏油 α 溴萘 折射率 1 1.33 1.515 1.66

·显微镜的几个光学特点： -介质折射率越接近镜头玻璃的(1.7)越好； -sina/2的最大值小于1；镜口率最大约1.6： -普通光线的波长为400~700nm,光镜分辨力约 为0.2μm,人眼的分辨力为0.2mm,因此显微镜 的最大有效倍数为1000。 Dm72008

• 显微镜的几个光学特点： – 介质折射率越接近镜头玻璃的（ 1. 7 ）越好； – sin α /2的最大值小于1；镜口率最大约1.6； – 普通光线的波长为400~700nm，光镜分辨力约 为0.2μm，人眼的分辨力为0.2mm，因此显微镜 的最大有效倍数为1000X