绍兴文理学院：《细胞生物学》课程教学资源（PPT课件）实验二 细胞凝集反应细胞膜的渗透性

实验二细胞凝集反应 细胞膜的渗透性 Dr.Tian 2002

实验二 细胞凝集反应 细胞膜的渗透性

一、实验目的 ·1.了解细胞膜的表面结构； ·2.了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细 胞膜的速度。 Dr.Tian 2002

一、实验目的 • 1 ．了解细胞膜的表面结构； • 2 ．了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细 胞膜的速度

二、实验的原理 ·1、细胞凝集反应 。凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质，能与 细胞外被的寡糖链相连接，使细胞发生凝集。 ·2、细胞膜的渗透性 ·在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血。 在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引 起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各 种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同。 Dr.Tian 2002

二、实验的原理 • 1、细胞凝集反应 • 凝集素是一类可逆结合特异糖基的蛋白质，能与 细胞外被的寡糖链相连接，使细胞发生凝集。 • 2、细胞膜的渗透性 • 在低渗液中，细胞很快吸水而胀裂，称为溶血。 在等渗液中，由于有些溶质会进入红细胞内、引 起细胞渗透压升高，细胞也会吸水胀裂，由于各 种物质透入细胞的速度不同，溶血的时间不同

三、实验用品 ·1·器材：显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、 烧杯、10ml移液管、试管、试管架 ·2,材料：土豆块茎 ·3,试剂：2%鸭血红细胞、抗凝血剂、PBS、土 豆块茎、0.17moL氯化钠和其他等渗液。 Dr.Tian 2002

三、实验用品 • 1 ．器材: 显微镜、天平、载玻片、滴管、离心管、 烧杯、10ml移液管、试管、试管架 • 2 ．材料: 土豆块茎 • 3 ．试剂: ２％鸭血红细胞、抗凝血剂、PBS、土 豆块茎、0.17mol/L氯化钠和其他等渗液

四、实验步骤 Dr.Tian 2002

四、实验步骤

(一)细胞凝集反应 1.2%鸭血红细胞悬液制备 ·新鲜鸭血加抗凝剂，生理盐水洗5次，每次2000r/min, 离心5min,按红细胞压积用生理盐水配成2%鸭血红细 胞悬液。 ·2,土豆凝集素制备 土豆2克，加10 ml PBS,浸泡2h 3,细胞凝集反应 -土豆凝集素1滴、2%鸭血红细胞液1滴 -载玻片上混匀，静置20min, ·.4.对照 -PBS1滴、2%鸭血红细胞液1滴 Dr.Tian 2002

• (一) 细胞凝集反应 • 1 ． ２％鸭血红细胞悬液制备 • 新鲜鸭血加抗凝剂，生理盐水洗５次，每次２０００r/min， 离心５min，按红细胞压积用生理盐水配成２％鸭血红细 胞悬液。 • 2 ．土豆凝集素制备 • 土豆２克，加１０ml PBS，浸泡２h • 3 ．细胞凝集反应 – 土豆凝集素１滴、２％鸭血红细胞液１滴 – 载玻片上混匀，静置２０min， • 4 ．对照 – PBS１滴、２％鸭血红细胞液１滴

(二)细胞膜的渗透性 1,低渗溶液 。 试管一支： -鸭血红细胞液 1 ml 一蒸馏水 10ml 一结果溶血，溶液变透明 ·2.等渗溶液 - 0.17mol/L氯化钠、0.17mol/L氯化铵、0.17mol/L醋酸 铵、0.17mol/L硝酸铵、0.12mol/L草酸铵、0.12mol/L 硫酸铵、0.32molL葡萄糖、0.32molL甘油、 0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮等8种溶液进行同样实 验，步骤同上。 Dr.Tian 2002

• （二）细胞膜的渗透性 • 1 ．低渗溶液 • 试管一支： – 鸭血红细胞液 １ml – 蒸馏水 10ml – 结果溶血，溶液变透明 • 2 ．等渗溶液 – 0.17mol/L氯化钠、0.17mol/L氯化铵、0.17mol/L醋酸 铵、0.17mol/L硝酸铵、0.12mol/L草酸铵、0.12mol/L 硫酸铵、0.32mol/L葡萄糖、0.32mol/L甘油、 0.32mol/L乙醇、0.32mol/L丙酮等８种溶液进行同样实 验，步骤同上