华东理工大学：《发酵工程 Fermentation Engineering》课程教学资源（PPT课件讲稿）第二章 生产中常用菌种的分离、选育和保藏

第二章生产中常用菌种的分离、 选育和保藏 第一节菌种的分离筛选 第二节培养分离 第三节工业微生物育种 第四节菌种的保藏及活化

第二章 生产中常用菌种的分离、 选育和保藏 第一节 菌种的分离筛选 第二节 培养分离 第三节 工业微生物育种 第四节 菌种的保藏及活化

带图象分析系统的微生物菌种 显微观察装置

带图象分析系统的微生物菌种 显微观察装置

第一节菌种的分离简介 菌种的来源 根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂 或菌种保藏部门索取或购买; ·从大自然中分离筛选新的微生物菌种

第一节 菌种的分离简介 一、菌种的来源 • 根据资料直接向有科研单位、高等院校、工厂 或菌种保藏部门索取或购买； • 从大自然中分离筛选新的微生物菌种

分离思路 新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照 生产的要求、菌种的特性,采用各种筛选方法, 快速、准确地把所需要的菌种挑选出来 实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌,也必 须重新进行分离纯化。 有了优良的菌种,还要有合适的工艺条件和合 理先进的设备与之配合

二、分离思路 • 新菌种的分离是要从混杂的各类微生物中依照 生产的要求、菌种的特性，采用各种筛选方法， 快速、准确地把所需要的菌种挑选出来。 • 实验室或生产用菌种若不慎污染了杂菌，也必 须重新进行分离纯化。 • 有了优良的菌种，还要有合适的工艺条件和合 理先进的设备与之配合

新种分离与筛选的步骤 定方案:首先要査阅资料,了解所需菌种的生 长培养特性。 采样:有针对性地采集样品 增殖:人为地通过控制养分或培养条件,使所 需菌种增殖培养后,在数量上占优势。 分离:利用分离技术得到纯种 发酵性能测定:进行生产性能测定。这些特性 包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特 性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温 度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工 艺等

• 定方案：首先要查阅资料，了解所需菌种的生 长培养特性。 • 采样：有针对性地采集样品。 • 增殖：人为地通过控制养分或培养条件，使所 需菌种增殖培养后，在数量上占优势。 • 分离：利用分离技术得到纯种。 • 发酵性能测定：进行生产性能测定。这些特性 包括形态、培养特征、营养要求、生理生化特 性、发酵周期、产品品种和产量、耐受最高温 度、生长和发酵最适温度、最适pH值、提取工 艺等。 三、新种分离与筛选的步骤

菌种筛选主要步骤 调查研究及查阅充分的资料 设计实验方案 确定采集样品的生态环境 采样 确定特定的增殖条件 增殖培养 J确定特殊的选择培养基及可能的 定性或半定量快速检出法 平板分离

菌种筛选主要步骤 • 调查研究及查阅充分的资料 ↓ 设计实验方案 ↓确定采集样品的生态环境 采样 ↓确定特定的增殖条件 增殖培养 ↓确定特殊的选择培养基及可能的 ↓定性或半定量快速检出法 平板分离 ↓

原种斜面 确定发酵培养基础条件 筛选 初筛(1株1瓶) 复筛(1株3~5瓶) 结合初步工艺条件摸索 再复筛(1株3~5瓶) 3~5株 单株纯种 ↓生产性能试验 毒性试验 菌种鉴定

• 原种斜面 ↓确定发酵培养基础条件 筛选 ↓ 初筛（1株1瓶） ↓ 复筛（1株3～5瓶） ↓结合初步工艺条件摸索 再复筛（1株3～5瓶） ↓ 3～5株 ↓ 单株纯种分离 ↓ 生产性能试验 ↓→毒性试验 菌种鉴定

(一)采样 1、采样对象 以采集土壤为主 般园田土和耕作过的沼泽土中,以细 菌和放线菌为主;富含碳水化合物的土 壤和沼泽地中,酵母和霉菌较多,如 些野果生长区和果园内。 米样的对象也可以是植物,腐败物品, 某些水域等

（一）采样 1、采样对象 以采集土壤为主。 • 一般园田土和耕作过的沼泽土中，以细 菌和放线菌为主；富含碳水化合物的土 壤和沼泽地中，酵母和霉菌较多，如一 些野果生长区和果园内。 • 采样的对象也可以是植物，腐败物品， 某些水域等

从自然界筛选

从自然界筛选

2、采样季节:以温度适中,雨量不多的秋初为好 3、采土方式:在选好适当地点后,用小铲子除去 表土,取离地面5-15cm处的土约10g,盛入清洁的 牛皮纸袋或塑料袋中,扎好,标记,记录采样时 间、地点、环境条件等,以备查考。为了使土样 中微生物的数量和类型尽少变化,宜将样品逐步 分批寄回,以便及时分离

• 2、采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初为好。 • 3、采土方式：在选好适当地点后，用小铲子除去 表土，取离地面5-15cm处的土约10g，盛入清洁的 牛皮纸袋或塑料袋中，扎好，标记，记录采样时 间、地点、环境条件等，以备查考。为了使土样 中微生物的数量和类型尽少变化，宜将样品逐步 分批寄回，以便及时分离