华南师范大学：《医学分子生物学》课程教学课件（PPT讲稿）第四章 复制 replication

Chapter 4 replication DNA replication DNA damage and repair Reverse transcription RNA replication

Chapter 4 replication DNA replication DNA damage and repair Reverse transcription RNA replication

DNA复制的基本特点 半保留复制(self- conservative replication) 复制子( replicon)

DNA复制的基本特点 • 半保留复制（self-conservative replication） • 复制子（replicon)

半保留复焦 1958年, Meselson和Stah首次用实验证 实了DNA的半保留复制 步骤: 用普通培养基(1N)培养1N标记的大肠 杆菌。用CsCl密度梯度离心法分析DNA 加热子一代DNA分子

半保留复制 • 1958年，Meselson 和Stahl首次用实验证 实了DNA的半保留复制。 • 步骤： • 用普通培养基（14N）培养15N标记的大肠 杆菌。用CsCl密度梯度离心法分析DNA。 • 加热子一代DNA分子

普通DNA 含1N-DNA 的沉降 的细菌 位置 培养于普 通培养液 普通DNA 第一代 →重DNA 继续培养于 普通培养液 第二代 重DNA 细菌的DNA双链 密度梯度离 粗线代表含N 心的结果 (细线代表含4N 图11-1DNA半保留复制的证据

复制子( replicon) 复制子:基因组中能单独进行复制的单位 每个起始点到终止点的区域为一个复制子 起始点( origin of replication,ori):原核生物DNA 分子中只有一个,长度200bp左右。大肠杆菌 oriC有245bp。真核生物有多个复制起始点 终点(ter):D、A、C、B(23bp共有序列) Tus( terminator utilization substance)识别终止 序列。 复制的方向:单向或双向

复制子（replicon) • 复制子:基因组中能单独进行复制的单位。 每个起始点到终止点的区域为一个复制子。 起始点（origin of replication ,ori):原核生物DNA 分子中只有一个，长度 200bp左右。大肠杆菌 ori C有245 bp。真核生物有多个复制起始点。 • 终点（ter）：D、A、C、B（23bp共有序列） Tus（terminator utilization substance）识别终止 序列。 • 复制的方向：单向或双向

T 起始点 终止点 复制 图15-5原核及真核细胞的DNA复制单位 O:复制起始点T:复制终止点

Dna蛋白结合位点 3个13b的联排列 4个%序列 一致性序列 致性序列 GATCTNTTNTTTT TYAT℃CACA 图46大肠杆菌omC基因排列示意图

b JK B mutL mut rpoB, C o/100 mut dnaP uvr」 dnaA rB C D PoA, D/570 muts recA lig 图119E.col基因图,示与复制有关的基因 注意起始点omC与终止点ter的位置

叉相遇心 N冷 terd, teTA terC, terB 叉1终止 叉2终止 复制叉2 起始点 复制叉1 图15-11E.cli复制终点

原核生物DNA聚合酶 (DNA polymerase, DNA pol 1958年 Kornberg首先从大肠杆菌提取 DNA pol I:聚合作用:5→ 3→5外切酶活性:校对功能 5→3`外切酶活性:引物切除、损伤修 复 主要功能是切除引物,填补冈崎片段产 生的空隙及DNA损伤的修复

原核生物DNA聚合酶 （DNA polymerase,DNA pol) • 1958年Kornberg首先从大肠杆菌提取 • DNA polⅠ：聚合作用：5` → 3` • 3` → 5`外切酶活性：校对功能 • 5` → 3`外切酶活性：引物切除、损伤修 复 • 主要功能是切除引物，填补冈崎片段产 生的空隙及DNA损伤的修复