温州医学院：《临床微生物及微生物检验》课程教学课件（PPT讲稿）临床标本的微生物学检验

临床标本的微生物学检验 李向阳

临床标本的微生物学检验 李向阳

血液标本的细菌学检验 目的和意义 正常人的血液是无菌的 一旦怀疑有菌血症,均应及早进行血 液标本的细菌学检验

血液标本的细菌学检验 • 目的和意义 • 正常人的血液是无菌的 • 一旦怀疑有菌血症，均应及早进行血 液标本的细菌学检验

血液标本的采集 采集时间及次数 发热早期或体温上升期 抗菌药物使用前或下次用药前 24h内3~4次,多部位采血 采血部位 肘静脉、股静脉、股动脉 采血量 1/10血培养瓶中培养基量的 不可从静脉留置针中采取血液标本!!

血液标本的采集 • 采集时间及次数 – 发热早期或体温上升期 – 抗菌药物使用前或下次用药前 – 24h内3~4次，多部位采血 • 采血部位 – 肘静脉、股静脉、股动脉 • 采血量 =1/10血培养瓶中培养基量的 • 不可从静脉留置针中采取血液标本!!!

血液标本的培养基 需氧菌 硫酸镁肉汤、葡萄糖酚红肉汤 胰化大豆胨肉汤 聚茴香磺酸钠SPS 对氨基苯甲酸、青霉素酶 厌氧菌 硫乙醇酸盐培养基 牛心脑浸液肉汤

血液标本的培养基 • 需氧菌 – 硫酸镁肉汤、葡萄糖酚红肉汤 – 胰化大豆胨肉汤 • 聚茴香磺酸钠SPS • 对氨基苯甲酸、青霉素酶 • 厌氧菌 – 硫乙醇酸盐培养基 – 牛心脑浸液肉汤

血液标本的检验过程 35℃孵育 ·每天观察一次 旦发现有细菌生长现象 立即涂片观察,初步报告 立即接种固体平板分离(血平板、巧克力平 板) 连续观察七天无菌生长,盲目接种固体 平板分离(血平板、巧克力平板)证实 无菌生长后报告阴性

血液标本的检验过程 • 35℃孵育 • 每天观察一次 • 一旦发现有细菌生长现象 – 立即涂片观察，初步报告 – 立即接种固体平板分离（血平板、巧克力平 板） • 连续观察七天无菌生长，盲目接种固体 平板分离（血平板、巧克力平板）证实 无菌生长后报告阴性

血液培养瓶中细菌的生长现象 肉汤均匀混浊,发酵葡萄糖产气 G杆菌 微混浊有绿色变化 —肺炎链球菌 血球层上面出现颗粒状生长,有自下而上的溶血 溶血性链球菌 混浊并有胶冻状凝固 病原性葡萄球菌 表面有菌膜,培养液清晰- 枯草杆菌 表面有菌膜,膜下呈绿色混浊 铜绿假单胞菌

血液培养瓶中细菌的生长现象 肉汤均匀混浊，发酵葡萄糖产气————— G-杆菌 微混浊有绿色变化————————— 肺炎链球菌 血球层上面出现颗粒状生长，有自下而上的溶血 ———溶血性链球菌 混浊并有胶冻状凝固—————— 病原性葡萄球菌 表面有菌膜，培养液清晰—————— 枯草杆菌 表面有菌膜，膜下呈绿色混浊——— 铜绿假单胞菌

血液标本检验结果的报告 阳性报告 培养×日有××菌生长 阴性报告 培养7日无细菌生长

血液标本检验结果的报告 • 阳性报告 – 培养×日有× ×菌生长 • 阴性报告 – 培养7日无细菌生长

快速检验的方法 双相培养基法 溶解离心法 荧光指示法 感一 ·16 SrRNA鉴定法 二二

快速检验的方法 • 双相培养基法 • 溶解离心法 • 荧光指示法 • 16S rRNA鉴定法

血液中常见的革兰阳性细菌 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、A群、 B群链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌 肠球菌、厌氧链球菌 产单核李斯特菌、炭疽芽胞杆菌、产气 荚膜梭菌

血液中常见的革兰阳性细菌 • 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、A群、 B群链球菌、绿色链球菌、肺炎链球菌、 肠球菌、厌氧链球菌 • 产单核李斯特菌、炭疽芽胞杆菌、产气 荚膜梭菌