《人体显微形态学》课程教学课件（PPT讲稿）实验3 外周血培养

实验三人类外周血淋巴细胞培养目的要求1、熟悉淋巴细胞培养原理2、掌握人类外周血淋巴细胞培养技术实验内容人类外周血淋巴细胞培养

实验三 人类外周血淋巴细胞培养 目的要求 1、熟悉淋巴细胞培养原理 2、掌握人类外周血淋巴细胞培养技术 实验内容 人类外周血淋巴细胞培养

实验原理健康成年人体内淋巴细胞约有500×109个，其中约2%在外周血中循环。在通常情况下，它们处于G或G,期。植物血球凝集素（PHA）可以刺激淋巴细胞进行有丝分裂。在相当于人体内环境（温度、营养条件、生长因子等）中，G.或G,期淋巴细胞转化为淋巴母细胞，重新进入增殖周期，进行有丝分裂。当体外培养至约72小时，大多数细胞处于第3增殖周期内，此时用有丝分裂阻断剂处理，可使细胞停止在有丝分裂中期

实验原理 健康成年人体内淋巴细胞约有500×109个，其中 约2%在外周血中循环。在通常情况下，它们处 于G0或G1期。植物血球凝集素（PHA）可以刺激 淋巴细胞进行有丝分裂。在相当于人体内环境（温 度、营养条件、生长因子等）中， G0或G1期淋巴细 胞转化为淋巴母细胞，重新进入增殖周期，进行有丝 分裂。当体外培养至约72小时，大多数细胞处于第3 增殖周期内，此时用有丝分裂阻断剂处理，可使细胞 停止在有丝分裂中期

培养基制备1640培养液：1640粉剂+碳酸氢钠适量+小牛血清10%+PHA+肝素适量，pH值为7.2。199培养液：199粉剂+碳酸氢钠适量+小牛血清5%+PHA+肝素适量，pH值为7.4

培养基制备 1640培养液：1640粉剂+碳酸氢钠适量+小牛血 清10%+PHA+肝素适量，pH值为7.2。 199培养液：199粉剂+碳酸氢钠适量+小牛血清 5%+PHA+肝素适量，pH值为7.4

实验步骤1、学习实验原理2、各项准备工作3、下周实验课前约72小时（上一周六上午）在实验室抽取外周血培养

实验步骤 1、学习实验原理 2、各项准备工作 3、下周实验课前约72小时 （上一周六上午）在实验室抽取外周血 培养

注意事项1、实验原理要理解2、部分准备工作班长作：培养液解冻、酒精灯消毒棉签、空针、压脉带、小烧杯。3、下周实验课前约72小时（上一周六上午）在实验室抽取外周血培养

注意事项 1、实验原理要理解 2、部分准备工作班长作：培养液解冻、酒精灯、 消毒棉签、空针、压脉带、小烧杯。 3、下周实验课前约72小时 （上一周六上午）在实验室抽取外周血培养