延安大学基础医学实验教学示范中心：《细胞生物学》实验课教学课件_实验二 细胞器的观察

实验二细胞器的观察

实验二 细胞器的观察

实验目的 1.掌握线粒体活体染色原理 2.掌握光学显微镜下线粒体、高尔基复合体的 基本形态特征。 3.熟悉线粒体、高尔基复合体的观察方法。 4.了解线粒体的活体染色的方法

一、实验目的 • 1. 掌握线粒体活体染色原理。 • 2. 掌握光学显微镜下线粒体、高尔基复合体的 基本形态特征。 • 3. 熟悉线粒体、高尔基复合体的观察方法。 • 4. 了解线粒体的活体染色的方法

二、实验用品 ·兔脊神经节切片标本、洋葱鳞茎、人口腔 黏膜上皮细胞、光学显微镜、载玻片、盖 玻片、镊子、牙签、剪刀、吸管、擦镜纸、 吸水纸、二甲苯、香柏油、1/5000詹纳斯 绿B染液(生理盐水配制)

二、实验用品 • 兔脊神经节切片标本、洋葱鳞茎、人口腔 黏膜上皮细胞、光学显微镜、载玻片、盖 玻片、镊子、牙签、剪刀、吸管、擦镜纸、 吸水纸、二甲苯、香柏油、1/5000詹纳斯 绿B染液（生理盐水配制）

、实验原理 ·1.高尔基复合体在光镜下呈网状、点状或线状结 构。神经组织切片中的高尔基复合体被硝酸银染 成棕褐色,可在光镜下看到其形态

三、实验原理 • 1. 高尔基复合体在光镜下呈网状、点状或线状结 构。神经组织切片中的高尔基复合体被硝酸银染 成棕褐色，可在光镜下看到其形态

、实验原理 2线粒体是细胞内物质氧化和能量转换的主要场 所,细胞的各项生命活动所需的能量主要是由线 粒体提供的。詹纳斯绿B( Janus green B)是 线粒体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素 氧化酶使染料保持氧化状态而呈蓝绿色,而在周 围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。核染 色较浅。在光镜下很容易观察到这种呈现特殊颜 色的线粒体

三、实验原理 • 2. 线粒体是细胞内物质氧化和能量转换的主要场 所，细胞的各项生命活动所需的能量主要是由线 粒体提供的。詹纳斯绿B（Janus Green B）是 线粒体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素 氧化酶使染料保持氧化状态而呈蓝绿色，而在周 围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。核染 色较浅。在光镜下很容易观察到这种呈现特殊颜 色的线粒体

四、实验方法 ·1.人口腔黏膜上皮细胞线粒体的活体染色及观察 将洁净的载玻片平放在实验台上,滴2滴詹纳 斯绿B染液于玻片中央,用消毒牙签刮取口腔颊部 黏膜细胞于染液中混匀,染色5~10mn,加盖玻 片后观察。在高倍镜或油镜下可见在接近无色的口 腔黏膜上皮细胞的细胞质中散布着一些蓝绿色的短 杆状或颗粒状的线粒体

四、实验方法 • 1. 人口腔黏膜上皮细胞线粒体的活体染色及观察 • 将洁净的载玻片平放在实验台上，滴2滴詹纳 斯绿B染液于玻片中央，用消毒牙签刮取口腔颊部 黏膜细胞于染液中混匀，染色5～10min，加盖玻 片后观察。在高倍镜或油镜下可见在接近无色的口 腔黏膜上皮细胞的细胞质中散布着一些蓝绿色的短 杆状或颗粒状的线粒体

四、实验方法 2.洋葱细胞线粒体的活体染色及观察 将洁净的载玻片平放在实验台上,滴2滴詹纳斯 绿B染液。用镊子小心撕下一块5×5mm的洋葱鳞 茎内表皮,使其平展于染液中,染色9~10min,吸 管吸取蒸馏水滴于染色的载玻片上,冲淡染液,盖 上盖玻片,再用吸水纸吸去多余水分。在高倍镜或 油镜下可见到蓝绿色颗粒状或线状结构,即为线粒 体

四、实验方法 • 2. 洋葱细胞线粒体的活体染色及观察 • 将洁净的载玻片平放在实验台上，滴2滴詹纳斯 绿B染液。用镊子小心撕下一块5×5mm的洋葱鳞 茎内表皮，使其平展于染液中，染色9～10min，吸 管吸取蒸馏水滴于染色的载玻片上，冲淡染液，盖 上盖玻片，再用吸水纸吸去多余水分。在高倍镜或 油镜下可见到蓝绿色颗粒状或线状结构，即为线粒 体

五、作业 ·1.绘制光镜下线粒体、高尔基复合体的形态图。 2.线粒体活体染色的原理是什么?

五、作业 • 1. 绘制光镜下线粒体、高尔基复合体的形态图。 • 2. 线粒体活体染色的原理是什么？