北京化工大学理学院：《分离科学与技术》课程电子教案（PPT教学课件）第六章 薄层色谱法（Thin-layer Chromatography，TLC）

薄层色谱法 (Thin-layer Chromatography, TLC)

薄 层 色 谱 法 （Thin-layer Chromatography，TLC）

目录 前 二基本参数 三薄层层析的操作 四特殊的薄层 五应用举例 WindowsXP

目 录 一 前言 二 基本参数 三 薄层层析的操作 四 特殊的薄层 五 应用举例

一前言 定义: 薄层色谱法通常指以吸附剂为固定相的一种 液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑 料等光洁的表面上均匀地铺成薄层,试样点 在薄层的一端,流动相借毛细作用流经固定 相,使被分离的物质展开。 常用的薄层色谱法以吸附剂为固定相,属于吸附色谱的范畴

3 薄层色谱法通常指以吸附剂为固定相的一种 液相色谱法。即将固定相在玻璃、金属或塑 料等光洁的表面上均匀地铺成薄层，试样点 在薄层的一端，流动相借毛细作用流经固定 相,使被分离的物质展开。 一.前言 定义: 常用的薄层色谱法以吸附剂为固定相,属于吸附色谱的范畴

特点 薄层色谱与液相色谱法比较 HPLC TLC 每次只能分析一个样品在一块板上点上多个样品 同时进行分离 对样品制备要求高,必须不用毕一次弃去,可直接用 含可吸留在柱上的杂质,否样品的粗提物点样 则柱性能受损 可用功检测器种类较少展开后可用多种手段检测

4 薄层色谱与液相色谱法比较 HPLC TLC 每次只能分析一个样品 在一块板上点上多个样品 同时进行分离 对样品制备要求高，必须不 含可吸留在柱上的杂质，否 则柱性能受损 用毕一次弃去，可直接用 样品的粗提物点样 可用功检测器种类较少 展开后可用多种手段检测 特点

薄层色谱与柱层析和纸层析比较 (1)快速(数十秒~数十分钟) (2)分离效率高(多柱路) (3)灵敏度高 (斑点扩散小,比纸色谱高10-100倍) (4)显色方法多样(腐蚀性显色剂) (5)图象易保存

5 薄层色谱与柱层析和纸层析比较 (1)快速(数十秒~数十分钟) (2)分离效率高(多柱路) (3)灵敏度高 (斑点扩散小,比纸色谱高10-100倍) (4)显色方法多样(腐蚀性显色剂) (5)图象易保存

基本参数 口比移值(R) R+=原点至组分点中心的距离/原 点至流动前沿的距离 组分A的R=a/c A自 组分B的R=b/c 口相对比移值,即相对于某一物质κ的R值,用Rx 表示。 其定义为:Rx=组分的R值/物质x的R值 组分A相对于物质B的“相对比移值”RB =a/b

6  比移值（Rf） Rf =原点至组分点中心的距离/原 点至流动前沿的距离 组分A的Rf =a/c 组分B的Rf =b/c  相对比移值，即相对于某一物质x的Rf值，用Rx 表示。 其定义为：Rx＝组分的Rf值／物质x的Rf值 组分A相对于物质B的“相对比移值” RB =a/b 二. 基本参数

薄层色谱的操作 口吸附剂的选择 口薄层板的制作 口展开剂的选择 口点样 口展开 口定位与显色 口薄层层析的定量测定

7 三.薄层色谱的操作  吸附剂的选择  薄层板的制作  展开剂的选择  点样  展开  定位与显色  薄层层析的定量测定

(一)薄层层析用的吸附剂 口常用的薄层层析吸附剂有硅胶,氧化铝,纤 维素,聚酰废等 口吸附剂的选择:首先决定于样品成分的性质, 即它们的溶解性,酸碱性、极性以及是否与 吸附剂起化学反应等; 口其次要考虑吸附剂、载体是否容易得到及其 价格等

8 (一) 薄层层析用的吸附剂  常用的薄层层析吸附剂有硅胶、氧化铝、纤 维素、聚酰胺等。  吸附剂的选择：首先决定于样品成分的性质， 即它们的溶解性、酸碱性、极性以及是否与 吸附剂起化学反应等；  其次要考虑吸附剂、载体是否容易得到及其 价格等

表5-1薄层色谱用硅胶的技术参数 项目 范围值 典型值 项目 范围值 典型值 密度/(g/cm2) 0.3~0.5 约0.4 孔体积/(mL/g) 0.8 比表面积/(m2/g) 400~600 约500 pH值 5~7 7.0 孔径/nm ~15 6.0 粒度/m 10~50 40 表5-2常用薄层用硅胶的特征 硅胶商品名称薪合剂 荧光添加剂 应用 硅胶H 无 薄层色谱,干柱色谱 硅胶G(TyPe60) 煅石膏 薄层色谱,干柱色谱 在波长为254mm紫外灯照 硅胶GF254 煅石膏锰激活的硅酸锌(ZmSO:Mn)波 长254mm 射下荧光检出 银激活的硫化锌、硫化锅 在波长为365m紫外灯照 硅胶GF365 煅石膏 (ZnS·Cds:Ag)波长365nm 射下荧光检出 薄层色谱,干柱色谱不易显 锰激活的硅酸锌(Zn2SiO4:Mn) 硅胶HF254 色或易与显色剂起化学反应 波长254mm 的化合物

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(二)薄层板的制作 层析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂(纸浆、纤维素、硅胶 中性氧化物、聚酰胺、多孔性玻璃粉,硅烷化健合硅胶等)均匀 地涂在在薄层板(玻璃板、金属板或弹性塑料板)上,干燥 (110C活化)后即可使用。 层析硅段

10 层析板是用专门的涂布器把浆状的吸附剂（纸浆、纤维素、硅胶、 中性氧化物、聚酰胺、多孔性玻璃粉，硅烷化健合硅胶等）均匀 地涂在在薄层板（玻璃板、金属板或弹性塑料板）上，干燥 （110℃活化）后即可使用。 (二) 薄层板的制作