华东理工大学：《微生物学》第四章 微生物的生长与环境条件

第四章微生物的生长与环境条件 刘雅婷 2003年7月

第四章 微生物的生长与环境条件 刘雅婷 2003年7月

第一节纯培养微生物的群体生长 得纯培养的方法 (一)稀释分离法 1.稀释平皿分离法 2.平皿划线分离法 3.单细胞挑取法 (二)选择培养基 细菌群体生长的测量 (一)细胞数量的测量 (二)细胞生物量的测定 、分批培养中细菌群体的生长

第一节 纯培养微生物的群体生长 一、获得纯培养的方法 （一）稀释分离法 1.稀释平皿分离法 2.平皿划线分离法 3.单细胞挑取法 （二）选择培养基 二、细菌群体生长的测量 （一）细胞数量的测量 （二）细胞生物量的测定 三、分批培养中细菌群体的生长

l.稀释平皿分离法 (1)稀释 m m 100ml /100 1/100010-410510610-7108

1.1.稀释平皿分离法 稀释平皿分离法 100ml 1g 9ml 9ml 9ml 9ml 9ml 9ml 1/100 1/1000 10-8 10-7 10-6 10-5 10-4 1ml (1)稀释 1ml 1ml 1ml 1ml

1.稀释平皿分离法 a.倾注平皿分高法 b.涂布平皿分高法 基内菌落 表面菌落 将待分离样品稀释液 加入灭菌的培 稀释倒平皿分 加入无菌培养皿中 养基,摇匀 离法典型结果 ∈ 表面菌落 将却 培养皿倒置培养 取0.1m1或更少菌 涂布平板分离 液加入到无菌固体 用已灭菌的刮铲 法典型结果 培养基表面 在培养基表面涂布 使菌液均匀铺开 图41稀释平皿分离法 a,倾注平皿法b.涂布平皿法

1.稀释平皿分离法 a.倾注平皿分离法 b.涂布平皿分离法

2.平皿划线分离法 a.连续划线分离法b.分区划线分离法

2.平皿划线分离法 a. 连续划线分离法 b. 分区划线分离法

3.单细胞挑取法 接种针 解剖镜

3.单细胞挑取法 接种针 解剖镜 ……….. .. …

(二)选择培养基 在培养基中加入某些化学物质 或除去某些营养物质以抑制不需要 微生物生长。而促进某种微生物的 生长

（二）选择培养基 在培养基中加入某些化学物质 或除去某些营养物质以抑制不需要 微生物生长，而促进某种微生物的 生长

细菌群体生长的测量 (一)细胞数量的测量 细菌计数器面积为1mm2,划分为25个大方格 盖玻片 显 十数板 微 (a)在计数区滴加菌液,盖上特制盖玻片, 利用毛细作用让菌液充满计数区 镜 测 菌液充满计数区,盖玻下方格的位置 (c)计数时使用油镜,一般数5个大方格 盖玻片 的菌数后计算每个大方格的平均菌数 如图所示,大方格中有14个细菌。 数 计数板 (b)细菌计数器面积为1mm2,划分为25个大方格,(d)每个大方格的体积是1/12500001 法 每个大方格又分为16个小格。计数区的深度为 (125mm2×0.02mm),用每个大 0.02mm。 方格的平均菌数×1250000,即 为每毫升菌液含菌数 图43用 Petroff-Hausser计数器直接 显微镜测数方法的操作步骤

二、细菌群体生长的测量 （一）细胞数量的测量 显 微 镜 测 数 法

细菌群体生长的测量 (一)细胞数量的测量 应用紫外分光光度计测定OD值 比 浊 法 mm自

二、细菌群体生长的测量 （一）细胞数量的测量 比 浊 法 应用紫外分光光度计测定OD值

1.0ml 1. 0ml 1.0ml 1.0ml 稀释平皿测数 9mlH20 有机样品(1/10溶液)(1/100液)(1/100溶液)(1000液) 1. 0ml /10ml 和热琼脂混合并摇匀 法 图44稀释平皿测数法示意图

稀释平皿测数法