华中科技大学：《仪器分析实验》课程教学资源（教案讲义）分子荧光分光光度仪RF5301操作规程

RF5301分子荧光光度计一．开机：打开计算机，打开仪器电源开关（拨向标“I”的方向），把Xe灯拨至ON位置，点亮氙灯，双击桌面上的RF-530XPC图标，仪器自检后，进入操作界面。二．测定1.激发和发射光谱扫描（1）点击Configure-Parameters，进入SpectrumParameters设置。（2）发射光谱曲线扫描：选择Emission，输入合适的参数后，点击OK，接着点击Start进行扫描，找到最大发射波长Emmax。（3）激发光谱曲线扫描：同样在SpectrumParameters设置界面上，选择Excitation，在EMWavelength处输入（2）找到的Emmax，再输入合适的参数后，点击OK，接着点击Start进行扫描，找到最大激发波长Exmax。（4）数据保存和转换，点击File→save，保存文件到适当位置，点File→DataTranslation→AScIIl进行数据格式转换。2.单点荧光强度的测定通过上面（2）操作，输入扫描得到的最大激发Exmax和发射波长Emmax，点击“GOTOW”-→OK→Read，得到特定激发和发射波长下样品的荧光强度。3.峰面积计算对（2）或（3）扫描的光谱曲线峰计算峰面积，Manipulate→移动光标，设置峰起止的波长start和end→点击Recal软件自动计算积分面积。三、关机（1）点击File-Channel-EraseChannel退出通道（2）关闭软件（3）关闭Xe灯，冷却30min（4）关闭主机电源

RF5301 分子荧光光度计 一．开机： 打开计算机，打开仪器电源开关（拨向标“I”的方向），把 Xe 灯拨至 ON 位置，点亮 氙灯，双击桌面上的 RF-530XPC 图标，仪器自检后，进入操作界面。 二．测定 1．激发和发射光谱扫描 （1）点击 Configure→Parameters，进入 Spectrum Parameters 设置。 （2）发射光谱曲线扫描：选择 Emission, 输入合适的参数后，点击 OK，接着点击 Start 进行扫描，找到最大发射波长 Emmax。 （3）激发光谱曲线扫描：同样在 Spectrum Parameters 设置界面上，选择 Excitation，在 EM Wavelength 处输入（2）找到的 Emmax，再输入合适的参数后，点击 OK，接着点击 Start 进行扫描，找到最大激发波长 Exmax。 （4）数据保存和转换，点击 File→save，保存文件到适当位置，点 File→Data Translation→ASCⅢ进行数据格式转换。 2．单点荧光强度的测定 通过上面（2）操作，输入扫描得到的最大激发 Exmax 和发射波长 Emmax，点击“GO TO W” →OK→Read，得到特定激发和发射波长下样品的荧光强度。 3. 峰面积计算 对（2）或（3）扫描的光谱曲线峰计算峰面积，Manipulate→移动光标，设置峰起止的 波长 start 和 end→点击 Recal 软件自动计算积分面积。 三．关机 （1）点击 File→Channel→Erase Channel 退出通道 （2）关闭软件 （3）关闭 Xe 灯，冷却 30min （4）关闭主机电源