沈阳药科大学：《仪器分析》课程教学资源（PPT课件讲稿）经典液相色谱法

第四节经典液相色谱法 液相色谱法:以液体为流动相的色谱法称 经典液相色谱:固定相颗粒较大且不均匀 常压下输送流动相 柱效较低 分析周期长 现代液相色谱:固定相颗粒小且均匀 高压下输送流动相 柱效较高 分析周期短

第四节 经典液相色谱法 液相色谱法：以液体为流动相的色谱法称～。 ▪ 经典液相色谱：固定相颗粒较大且不均匀 常压下输送流动相 柱效较低 分析周期长 ▪ 现代液相色谱：固定相颗粒小且均匀 高压下输送流动相 柱效较高 分析周期短

液固吸附色谱 )分离原理 二)常用吸附剂 (三)吸附剂和流动相的选择

一、液-固吸附色谱 （一）分离原理 （二）常用吸附剂 （三）吸附剂和流动相的选择

(一)分离原理 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂表面的活性吸附中心对不同组分的 吸附能力差异而实现分离 二)常用吸附剂:多孔、微粒状物质 1.硅胶 2.氧化铝 3.聚酰胺

（一）分离原理 各组分与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心 利用吸附剂表面的活性吸附中心对不同组分的 吸附能力差异而实现分离 （二）常用吸附剂：多孔、微粒状物质 1. 硅胶 2. 氧化铝 3. 聚酰胺

1硅胶(SiO2HO) 结构:内部—硅氧交联结构→多孔结构 表面—有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心 -H… O-H…O-H -SI-OH Si-//-Si- 游离羟基I 束缚形Ⅱ 活泼形Ⅲ 特性: 1)与极性物质或不饱和化合物形成氢键 物质极性↑,吸附能力↑→强极性吸附中心,不易洗脱 吸附活性次序:活泼型>束缚型>游离型 2)吸水→失活 →105~1109C烘干30分钟(可逆失水)→吸附力最大 →5009C烘干(不可逆失水)活性丧失,无吸附力 适用:分析酸性或中性物质

1. 硅胶（SiO2·H2O） 结构：内部——硅氧交联结构→多孔结构 表面——有硅醇基→氢键作用→吸附活性中心 特性： 1）与极性物质或不饱和化合物形成氢键 物质极性↑，吸附能力↑→强极性吸附中心，不易洗脱 吸附活性次序：活泼型>束缚型>游离型 2）吸水→失活 →105～110OC烘干30分钟(可逆失水)→吸附力最大 →500OC烘干(不可逆失水)→活性丧失，无吸附力 适用：分析酸性或中性物质

续前 2氧化铝 碱性氧化铝pH9~10适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝pH>7.5适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝pH4~5适于分析酸性、中性物质 3.聚酰胺 氢键作用 氢键能力个强,组分越后出柱

续前 2. 氧化铝 碱性氧化铝 pH 9～10 适于分析碱性、中性物质 中性氧化铝 pH＞7.5 适于分析酸性碱性和中性物质 酸性氧化铝 pH 4～5 适于分析酸性、中性物质 3. 聚酰胺 氢键作用 氢键能力↑强，组分越后出柱

(三)吸附剂和流动相的选择: 依据被测组分、吸附剂和流动相的性质 1.被测组分性质(极性大小): 烃< 羧酸,醇 2.吸附剂的活性 吸附剂的活性个大,对被测组分的吸附能力↑强 强极性物质—选择弱吸附剂 弱极性物质选择强吸附剂 3.流动相的极性: 流动相极性个大,对被测组分的洗脱能力↑大 相似相溶”原则:根据组分性质、吸附剂的活 性 选择适当极性的流动相

（三）吸附剂和流动相的选择： 依据被测组分、吸附剂和流动相的性质 1. 被测组分性质（极性大小）： 烃＜ - - - - - - - - ＜羧酸，醇 2. 吸附剂的活性： 吸附剂的活性↑大，对被测组分的吸附能力↑强 强极性物质——选择弱吸附剂 弱极性物质——选择强吸附剂 3. 流动相的极性： 流动相极性↑大，对被测组分的洗脱能力↑大 “相似相溶”原则 ：根据组分性质、吸附剂的活 性， 选择适当极性的流动相

续前 4.三者关系图示: 组分 吸附剂 流动相 极性 活性小 极性 非(弱)极性活性大 非极性或弱极性

续前 4. 三者关系图示： 组分 吸附剂 流动相 极性 活性小 极性 非(弱)极性 活性大 非极性或弱极性

薄层色谱法 (一)概述 )定性参数 (三)吸附剂的选择 (四)展开剂的选择 (五)薄层板的制备 (六)定性与定量分析

二、薄层色谱法 （一）概述 （二）定性参数 （三）吸附剂的选择 （四）展开剂的选择 （五）薄层板的制备 （六）定性与定量分析

(一)概述 1.定义:将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上, 形成薄层而进行色谱分离和分析的方法 2.操作过程:见图示 铺板→活化→点样→展开→定位(定性)洗脱(定量 3.分离机制:吸附(分配,离子交换,空间排阻) 4.特点:分析快速、灵敏、显色方便 5.应用:药物杂质检查、纯度测定next

（一）概述 1．定义：将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上， 形成薄层而进行色谱分离和分析的方法 2．操作过程：见图示 铺板 →活化 →点样 → 展开 →定位(定性)/洗脱(定量) 3．分离机制：吸附（分配，离子交换，空间排阻） 4．特点：分析快速、灵敏、显色方便 5．应用：药物杂质检查、纯度测定 next

图示 2 图177喜层色谱展开装置图 ,上行开装置b.卧式上行展开装置 1.薄板2.滤纸3.色谱缸4.展开剂5.玻璃块

图示