海洋浮游生物调查规范

目次 1范围 ....................................... 1 2规范性引用文件 ....................................... / 3术语和定义 4一般规定·· 2 5浮游生物生态调查 3 5.1调查内容和方法 ....................... 3 5.2海上调查 .................................................... 5.3样品整理与分析 6 10 6大型底栖生物生态调查·· 12 6.1调查内容和方法· ............................... 12 6.2样品采集·.·. .................. 13 6.4资料整理与保存. ....................... .............................. 17 7潮间带生物生态调查................ ...................................... 17 17 .................. ........ 21 7.4资料整理···· .......................... ................... ........ 22 8叶绿素-a的测定 23 8.1荧光分光光度法 ....................................................................... 23 8.2分光光度法· .... 24 表1浅水I型浮游生物网规格 4 表2浅水Ⅱ型浮游生物网规格 4 表3浅水Ⅲ型浮游生物网规格 ........................... ................ .......... 4 表4内标签式样 7 表5采泥标签 ............ 16 表6拖网标签 ....... 16 表7定量标签 表8定性标签

目 次 1 范围 . 1 2 规范性弓i用文件 ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．． 3 术语和定义 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . l 4 一般规定 .························.•. 2 5 浮游生物生态调查 . ·········. 3 5. 1 调查内容和方法 . 3 5. 2 海上洞查 ···············. ·················· ····················· ···············. ············ 4 5. 3 样品整理与分析 ·········. 6 5. 4 资料整理.·. 10 6 大刮底栖生物生态调查.·. ·. ·. ·. · 12 6. l 悯查内容和方法. 12 6. 2 样品采集.·. ·. ·. ·. .•. 13 6. 3 室内标本处理. 16 6. 4 资料整理与保存.·. ·. ·. ·. ·. ·. ·. 17 7 潮间带生物生态调查.·. ·. 17 7. I 调查内容和方法. 17 7. 2 样品采集.·. 19 7. 3 室内标本整理、鉴定和保存 .·. ·. ·. ·. · 21 7. 4 资料整理. 22 8 叶绿素-a的测定 . 23 8. 1 荧光分光光度法. 23 8. 2 分光光度法. 24 表1 浅水I型浮游生物网规格. 4 表2 浅水II型浮游生物网规格. 4 表3 浅水III型浮游生物网规格. 4 表4 内标签式样. 7 表5 采泥标签 . 16 表6 拖网标签 . 16 表7 定量标签 . 21 表8 定性标签 . 21

海洋浮游生物调查1范围GB17378的本部分规定了近海污染生态调查和生物监测的样品采集、实验、分析、资料整理等方法的技术要求。本部分适用于近海环境污染的生物学调查、监测和评价。2规范性引用文件下列文件中的条款通过GB17378的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。GB3097--1997海水水质标准GB/T12763.4海洋调查规范GB17378.1-海洋监测规范第1部分：总则GB17378.2海洋监测规范第2部分：数据处理与分析质量控制GB17378.3海洋监测规范第3部分：样品采集、存与运输GB17378.4海洋监测规范第4部分：海水分析GB17378.5海洋监测规范第5部分：沉积物分析GB 17378.6海洋监测规范第6部分：生物体分析2海洋沉积物质量GB18668--20023术语和定义下列术语和定义适用于GB17378的本部分。3. 1浮游生物plankton体型细小悬浮于水层中，无或仅有微弱游泳能力随水流移动的水生生物。3.2大型底栖生物macrobenhthos底栖生物的一类，不能通过0.5mm孔径网筛的底栖生物。3.3大型浮游生物macroplankton个体在（5～10）mm之间的浮游生物。水母、大型桡足类、磷虾类、樱虾类、被囊类、毛颚动物、翼足类软体动物和异足类软体动物等的统称。3.4指标生物indexorganism对某种污染物质有很强的忍受能力或对某种污染物敏感的生物种类。1

海洋浮游生物调查 1 范围 GB 17378的本部分规定了近海污染生态调查和生物监测的样品采集、实验、分析、资料整理等方 法的技术要求。 本部分适用于近海环境污染的生物学调查、监测和评价。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过GB 17378的本部分的引用而成为本部分的条款。 凡是注日期的引用文 件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成 协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。 凡是不注日期的引用文件，其最新版本 适用于本 部分。 GB 3097-1997 海水水质标准 GB/T 12763. 4 海洋调查规范 GB 17378. 1 海洋监测规范 第1部分：总则 GB 17378. 2 海洋监测规范 第2部分：数据处理与分析质量控制 GB 17378. 3 海洋监测规范 第3部分：样品采集、贮存与运输 GB 17378. 4 海洋监测规范 第4部分：海水分析 GB 17378. 5 海洋监测规范 第5部分：沉积物分析 GB 17378. 6 海洋监测规范 第6部分：生物体分析 GB 18668 — 2002 海洋沉积物质量 3 术语和定义 下列术语和定义适用于GB 17378的本部分。 3. 1 浮游生物 plankton 体型细小悬浮于水层中，无或仅有微弱游泳能力随水流移动的水生生物。 3. 2 大型底栖生物 macrobenhthos 底栖生物的一类，不能通过0. 5 mm孔径网筛的底栖生物。 3. 3 大型浮游生物 macroplankton 个体在(5�lO)mm之间的浮游生物。 水母、大犁挠足类、磷虾类、樱虾类、被囊类、毛颓动物、翼足 类软体动物和异足类软体动物等的统称。 3.4 指标生物 index organism 对某种污染物质有很强的忍受能力或对某种污染物敏感的生物种类

3.5毒性试验toxicitytest将生物体置于试验条件下，施加污染物的影响，然后观察、测定生物异常或死亡效应，包括急性、亚急性、慢性毒性试验。3.6试液testsolution用作毒性试验的毒物溶液或排污口水样的不同浓度的稀释液。3.7稀释度dilution试液被稀释的程度（倍数）。3.8受试生物test organism用作毒性试验的生物。3.9受试验时间testingtime受试生物直接接触试液的起止时间范围。3. 10半数致死浓度halflethalconcentration在一定观察期内，造成50%的受试生物死亡的毒物浓度。3.11半数效应浓度halfeffectconcentration在一定观察期内，导致50%的受试生物出现某种异常反应（如回避、摄食率和呼吸率改变、平衡丧失等)的毒物浓度。.4一般规定近岸污染生态调查4.1近岸污染生态调查内容如下：一浮游生物生态调查；一大型底栖生物生态调查；潮间带生物生态调查。4.2生物监测生物监测内容如下：-叶绿素a;粪大肠菌群；一细菌总数；生物毒性试验；鱼类回避反应实验；滤食率测定；赤潮毒素一一麻痹性贝毒的检测。4.3调查和监测项目的选择近岸污染生态调查和监测项目选择应遵循以下原则：在调查和监测中，应依据目的、任务和性质考虑生物调查和监测的内容。通常，在基线（背景）调查和环境质量综合评价中，浮游生物生态调查、大型底栖生物生态调查、潮间带生物生态调2

3.5 毒性试验 toxicity test 将生物体置于试验条件下，施加污染物的影响，然后观察、测定生物异常或死亡效应，包括急性、亚 急性、慢性毒性试验。 3.6 试液 test solution 用作毒性试验的毒物溶液或排污口水样的不同浓度的稀释液。 3. 7 稀释度 dilution 试液被稀释的程度（倍数）。 3.8 受试生物 test organism 用作毒性试验的生物。 3.9 受试验时间 testing time 受试生物直接接触试液的起止时间范围。 3. 10 半数致死浓度 half lethal concentration 在一定观察期内，造成 50%的受试生物死亡的毒物浓度。 3. 11 半数效应浓度 half effect concentration 在一定观察期内，导致 50%的受试生物出现某种异常反应（如回避、摄食率和呼吸率改变、平衡丧 失等）的毒物浓度。 4 一般规定 4. 1 近岸污染生态调查 近岸污染生态调查内容如下： 浮游生物生态调查； —一大型底栖生物生态调查； 一潮间带生物生态调查。 4.2 生物监测 生物监测内容如下： —一－叶绿素a; 一一粪大肠菌群； － －－细菌总数； 一生物毒性试验； 一鱼类回避反应实验； 一滤食率测定； －赤潮毒素 麻痹性贝毒的检测。 4.3 调查和监测项目的选择 近岸污染生态调查和监测项目选择应遵循以下原则： 在调查和监测中，应依据目的、任务和性质考虑生物调查和监测的内容。 通常，在基线（背景） 调查和环境质量综合评价中，浮游生物生态调查、大型底栖生物生态调查、潮间带生物生态调 2

查、叶绿素a、粪大肠菌群和细菌总数等是应测项目；一在危害调查和排污口、倾废区、海上右油开发区等的监视监测中，应选测生物毒性试验、鱼类回避反应实验和滤食率测定等项目；一赤潮毒素（麻痹性贝毒）的检测，应在赤潮发生区和赤潮多发季节定期监测，或发现可疑的麻痹性贝毒(PSP)中毒事件时应用；运用污染生态调查资料常用评述方法（参见附录B）时应慎重，应比较几种方法所得的结果，并与传统的生态描述方法结合，进行综合分析：一几种受试动物的亲体产卵和幼虫阶段培养条件（参见附录C），因生物地区性很强，各地用其进行毒性试验时，应进行必要的试养；一一在生物监测中，对生物体内污染物质累积量的测定，也是主要内容之一。其分析测定方法见GB17378.6。5浮游生物生态调查5.1调查内容和方法5.1.1调查内容5.1.1.1生物调查调查浮游植物的种类组成和数量分布；浮游动物的生物量、种类组成和数量分布。5.1.1.2环境调查根据污染调查的目的、类型及污染源的性质，确定调查和监测项目。赤潮的环境调查和监测，特别应考虑营养盐、溶解氧、化学耗氧量、pH、水色、微量重金属、铁、锰、叶绿素a等的测定。5.1.2调查类型5.1.2.1现状调查（或称基础调查）掌握调查海域浮游生物的种类组成、数量分布、季节变化等生态学现状，为调查海域的污染生态监测和评价，提供背景资料。调查站位的布设应与环境监测设站相一致。若站位较密，工作量太大，浮游生物可考虑间隔站取样。调查时间每月一次，根据需要于大潮期和小潮期间进行。5.1.2.2监测性调查掌握污染海域，尤其是赤潮频发区的浮游生物（特别是赤潮生物种）的动态及其与环境的关系。通过长期资料积累，为环境和赤潮的预测、预报做好必要的准备工作。此类调查，站位布设不宜过多，可在现状调查的基础上，选择若于“热点”设站定期取样分析。一日发现异常，应密切注意其动向，适当增加调查次数，并按现状调查的站位，进行一次较全面的调查。每月大潮期间进行一次，在赤潮常发期（4月10月），5d调查监测一次，并设置对照测站。5.1.2.3应急跟踪调查应急跟踪调查是在发生突发性污染事故（如溢油）或发生赤潮时所采取的应急性行动。调查、监测应尽快赶赴现场取样，并持续到直观迹象消失。每天或隔天采样一次。站位布设应根据污染或赤潮发生范围，按梯度变化的情而定。同时应在事故范围之外，选取1个～2个站作为对照。5.1.3调查方法5.1.3.1采样浮游植物调查，一般只需采水样。测站水深在15m以内的浅海，采表、底两层；水深大于15m的采表、中、底三层。若需要详细了解其垂直分布，可按0m，3m，5m、10m、15m和底层等层次采样。当有必要进行昼夜连续观测时，可每间隔2h或3h按上述层次采样一次。5.1.3.2拖网通常用于浮游动物采样。浮游植物拖网采样，可考虑在需要详细分析种类组成时采用。一般使用3

查、叶绿素a、粪大肠菌群和细菌总数等是应测项目； 在危害调查和排污口、倾废区、海上石油开发区等的监视监测中，应选测生物毒性试验、鱼类回 避反应实验和滤食率测定等项目； 赤潮毒素（麻痹性贝毒）的检测，应在赤潮发生区和赤潮多发季节定期监测，或发现可疑的麻痹 性贝毒(PSP)中毒事件时应用； 运用污染生态调查资料常用评述方法（参见附录B)时应慎重，应比较儿种方法所得的结果，并 与传统的生态描述方法结合，进行综合分析； 几种受试动物的亲体产卵和幼虫阶段培养条件（参见附录 C)' 因生物地区性很强，各地用其进 行毒性试验时，应进行必要的试养； － 在生物监测中，对生物体内污染物质累积址的测定，也是主要内容之一。 其分析测定方法见 GB 17378. 6。 5 浮游生物生态调查 5. 1 调查内容和方法 5. 1. 1 调查内容 5. 1. 1. 1 生物调查 调查浮游植物的种类组成和数量分布；浮游动物的生物蜇、种类组成和数扯分布。 5. 1. 1. 2 环境调查 根据污染调查的目的、类型及污染源的性质，确定调查和监测项目。 赤潮的环境调查和监测，特别 应考虑营养盐、溶解氧、化学耗氧量、pH、水色、微届重金属、铁、猛、叶绿素a等的测定。 5. 1. 2 调查类型 5. 1. 2. 1 现状调查（或称基础调查） 掌握调查海域浮游生物的种类组成、数橇分布、季节变化等生态学现状，为调查海域的污染生态监 测和评价，提供背景资料。 调查站位的布设应与环境监测设站相 一致。 若站位较密，工作量太大，浮游生物可考虑间隔站取 样。 调查时间每月一次，根据需要于大潮期和小潮期间进行。 5. 1. 2. 2 监测性调查 掌握污染海域，尤其是赤潮频发区的浮游生物（特别是赤潮生物种）的动态及其与环境的关系。 通 过长期资料积累，为环境和赤潮的预测、预报做好必要的准备工作。 此类询查，站位布设不宜过多，可在现状调查的基础上，选择若干 “热点 ”设站定期取样分析。 一旦 发现异常，应密切注意其动向，适当增加调查次数，并按现状调查的站位，进行一次较全面的调查。 每月 大潮期间进行一次，在赤潮常发期(4月�10 月），5d 调查监测一次，并设置对照测站。 5. 1. 2. 3 应急跟踪调查 应急跟踪调查是在发生突发性污染事故（如溢油）或发生赤潮时所采取的应急性行动。 调查、监测 应尽快赶赴现场取样，并持续到直观迹象消失。 每天或隔天采样一次。 站位布设应根据污染或赤潮发 牛范围，按梯度变化酌情而定。 同时应在事故范围之外，选取 l 个�2 个站作为对照。 5. 1. 3 调查方法 5. 1. 3. 1 采样 浮游植物调查，一般只需采水样。 测站水深在 15m 以内的浅海，采表、底两层；水深大于 15m 的 采表、中、底三层。 若需要详细了解其垂直分布，可按 Om、3m、5m、10m、15m 和底层等层次采样。 当 有必要进行昼夜连续观测时，可每间隔 2 h 或 3 h 按上述层次采样一次。 5. 1. 3. 2 拖网 通常用于浮游动物采样。 浮游植物拖网采样，可考虑在需要详细分析种类组成时采用。 一般使用 3

规定的网具自海底至水面作垂直拖网采样。若需了解其垂直分布，可按5m0m、10m～5m、底至10m等层次作垂直分层拖网。若需进行昼夜连续观测，应与浮游植物采水样的时间间隔一致。5.2海上调查5.2.1采样工具和设备5.2.1.1浮游植物样品采水器。以下为浮游植物样品常用采水器：一-颠倒采水器；-卡盖式采水器。5.2.1.2网具使用以下类型的网具：一浅水型浮游生物网：用于采集大型浮游动物及鱼卵、仔稚鱼等。规格见表1；浅水Ⅱ型浮游生物网：用于采集中、小型浮游动物。规格见表2；浅水Ⅲ型浮游生物网：用于采集浮游植物样品，供分析种类组成时采用。规格见表3。表1浅水I型浮游生物网规格和材料位尺寸部内径50cm，网口面积0.20m2网圈用直径10mm的圆钢条网口部1长5cm，细帆布过滤部2长135cm，CQ14或JPlz筛绢直径9cm，长5cm，细帆布3网底部145cm长全表2浅水Ⅱ型浮游生物网规格尺寸和材料部位内径31.6cm，网口面积0.08m2，网圈用直径10mm的圆钢条网口部1长35cm，细帆布，中图圈直径50cm，网圈用直径10mm的圆钢条头部2长100cm，CB36或JP筛过滤部3直径9cm，长5cm细帆布网底部140cm全长表3浅水Ⅲ型浮游生物网规格尺寸和材料部位内径37cm，网口面积0.1m，网圈用直径10mm的圆钢条网口部1长5cm，细帆布过滤部2长130cm，JF2或JP筛3直径9cm，长5cm，细帆布网底部140cm全长5.2.1.3网底管浮游生物网末端收集标本的装置。其外径为9cm，所用筛组套与浮游生物网网衣的筛组规格一致。5.2.1.4闭锁器分层采集时控制浮游生物网网口关闭的装置

规定的网具自海底至水面作垂直拖网采样。 若需了解其垂直分布，可按 5 m�o m、10 m�5 m、底至 10 m等层次作垂直分层拖网。 若需进行昼夜连续观测，应与浮游植物采水样的时间间隔一致。 5.2 海上调查 5. 2. 1 采样工具和设备 5. 2. 1. 1 浮游植物样品采水器。 以下为浮游植物样品常用采水器： —一－颠倒采水器； － —-卡盖式采水器。 5. 2. 1. 2 网具 使用以下类型的网具： －浅水 I 型浮游生物网：用于采集大型浮游动物及鱼卵、仔稚鱼等。 规格见表1; 浅水II型浮游生物网：用于采集中、小型浮游动物。 规格见表2; 浅水ill型浮游生物网：用于采集浮游植物样品，供分析种类组成时采用。 规格见表3。 表1 浅水 I 型浮游生物网规格 部 位 尺 寸 和材料 网口部 内径50 cm, 网口面积0. 20 m气网圈用直径10 mm的圆钢条 1 长5 cm, 细帆布 过滤部 2 长135 cm,CQ14或JP12筛绢 网底部 3 直径9 cm, 长5 cm, 细帆布 全 长 145 cm 表2 浅水II型浮游生物网规格 部 位 尺 寸 和材料 网口部 内径31. 6 cm, 网口面积0.08 m勹网圈用直径10 mm的圆钢条 头锥部 1 长35cm, 细帆布，中圈直径50 cm, 网圈用直径10 mm的圆钢条 过滤部 2 长100 cm,CB36或JP,筛绢 网底部 3 直径9 cm, 长5 cm, 细帆布 全 长 140 cm 表3 浅水皿型浮游生物网规格 部 位 尺 寸 和材料 网口部 内径37 cm, 网口面积0.1 m气网圈用直径10 mm的圆钢条 1 长5 cm, 细帆布 过滤部 2 长130 cm,J凡或JP,o筛绢 网底部 3 直径9 cm, 长5 cm, 细帆布 全 长 140 cm 5. 2. 1. 3 网底管 浮游生物网末端收集标本的装置。 其外径为9 cm, 所用筛绢套与浮游生物网网衣的筛绢规格 一致。 5. 2. 1. 4 闭锁器 分层采集时控制浮游生物网网口关闭的装置。 4

5.2.1.5流量计测量浮游生物网滤水量装置，使用时安装于网口半径的中点，通过水流驱动其叶轮转动，记录器记录转数，经必要的换算，可求出流经网具的实际水量。未经检定的流量计，使用前应检定或在平静海区经现场标定后方可使用。标定方法是将流量计按实际使用时的位置，安装在不带网衣的网圈上，并按实际采样时的拖网速度从一定深度（10m或30m）垂直拖至表层，记录其转数。如此反复5次～10次，取得平均值，再计算每转的流量，则为流量计标定值。此值至少需保留三位有效数字。5.2.1.6船上设备以下设备为船上常备设备：绞车、吊杆及钢丝绳：绞车应配有变速（0.3m/s~1.5m/s）排缆装置和计数器的电动绞车。若缺乏该设备，可用建筑用的升降机或手摇绞车代替。钢线绳直径一般为4.8mm左右。吊杆安装需高出船炫3m，跨炫距约1m；一一冲水设备：水泵、水管、水桶和吸水球（大的洗耳球）；一照明设备。5.2.2样品采集5.2.2.1出海前的准备5.2.2.1.1按调查项目、站数、层次，准备足够的采样工具及已编号的各种标本瓶、固定剂、记录表等，装箱上船并放于适当位置，避免撞击和丢失；5.2.2.1.2认真检查船上设备是否运转正常，若遇故障，应及时排除或更换：5.2.2.1.3配制固定制浮游植物用碘液固定。其配制方法是将碘片（I.）溶于5%的碘化钾（KI）溶液中，使成饱和溶液。需要量按每升水样加该碘液6mL~8mL准备。浮游动物用5%甲醛固定。不必事先配制，只须按标本瓶容量的5%左右加人甲醛溶液即可。5.2.2.2到站前的准备5.2.2.2.1采集人员应提前到达工作岗位，再次检查网具及其附件、记录表及其他有关配备是否完善，发现问题及时处理：5.2.2.2.2船只到站时，应先核对站位，待船停稳后，测其实际水深，确定采样层次及钢丝绳应放长度。5.2.2.3采样5.2.2.3.1浮游植物水样采集浮游植物水样采集应按以下要求进行：一用颠倒采水器或卡盖式采水器，其使用方法及操作步骤与水质项目采样相同；采样层次视调查需要、计划规定和海区各站实际水深而定；一水样采集务必与叶绿素a和水质项目的采水同步进行：所需水样量一般为500mL；一采样后，应及时按每升水样加6mL～8mL碘液固定。5.2.2.3.2垂直拖网采样分别用浅水、几型浮游生物网自底至表垂直拖电采集浮游动物。若需网采浮游植物，则用浅水Ⅱ型网。其操作步骤如下：每次下网前应检查网具有否破损，发现破损应及时修补或更换网衣；检查网底管和流量计是否处于正常状态，并把流量计指针拨至指零；放网人水，当网口贴近水面时，需调整计数器指针于零的位置；网口人水后，下网速度一般不能超过1m/s，以钢丝绳保持紧直为准；当网具接近海底时，绞车应减速，当沉锤着底，钢丝绳出现松弛时，应立即停车，记下绳长：—网具到达海底后可立即起网，速度保持在0.5m/s左右；网口未露出水面前不可停车：网口离5

5. 2. 1. 5 流量计 测量浮游生物网滤水量装置，使用时安装于网口半径的中点，通过水流驱动其叶轮转动，记录器记 录转数，经必要的换算，可求出流经网具的实际水最。 未经检定的流措计，使用前应检定或在平静海区经现场标定后方可使用。 标定方法是将流量计按 实际使用时的位置，安装在不带网衣的网圈上，并按实际采样时的拖网速度从一定深度(10 m或 30 m) 垂直拖至表层，记录其转数。 如此反复 5 次-10 次，取得平均值，再计算每转的流量，则为流量计标定 值。 此值至少需保留三位有效数字。 5. 2. 1. 6 船上设备 以下设备为船上常备设备： 绞车、吊杆及钢丝绳：绞车应配有变速(0. 3 m/s -1. 5 m/s)排缆装置和计数器的电动绞车。 若缺乏该设备，可用建筑用的升降机或手摇绞车代替。 钢线绳直径一般为 4. 8 mm左右。 吊 杆安装需高出船舷 3 m, 跨舷距约 1 m; 冲水设备：水泵、水管、水桶和吸水球（大的洗耳球）； 照明设备。 5.2.2 样品采集 5. 2. 2. 1 出海前的准备 5. 2. 2. 1. 1 按调查项目、站数、层次，准备足够的采样工具及己编号的各种标本瓶、固定剂、记录表等， 装箱上船并放于适当位置，避免撞击和丢失； 5. 2. 2. 1. 2 认真检查船上设备是否运转正常，若遇故障，应及时排除或更换； 5. 2. 2. 1. 3 配制固定制 浮游植物用殡液固定。 其配制方法是将殡片 (I2)溶于5%的碳化钾(KI)溶液中，使成饱和溶液。 需要量按每升水样加该碟液 6 mL-8 mL 准备。 浮游动物用5%甲醒固定。 不必事先配制，只须按标本瓶容量的5%左右加入甲醒溶液即可。 5.2.2.2 到站前的准备 5. 2. 2. 2. 1 采集人员应提前到达工作岗位，再次检查网具及其附件、记录表及其他有关配备是否完善， 发现问题及时处理； 5.2.2.2.2 船只到站时，应先核对站位，待船停稳后，测其实际水深，确定采样层次及钢丝绳应放长度。 5.2.2.3 采样 5. 2. 2. 3. 1 浮游植物水样采集 浮游植物水样采集应按以下要求进行： 用颠倒采水器或卡盖式采水器，其使用方法及操作步骤与水质项目采样相同； 采样层次视涸查需要、计划规定和海区各站实际水深而定； 水样采集务必与叶绿素a和水质项目的采水同步进行； 所需水样植一般为 500 mL; - 采样后，应及时按每升水样加 6 mL-8mL 殡液固定。 5.2.2.3.2 垂直拖网采样 分别用浅水I、II型浮游生物网自底至表垂直拖曳采集浮游动物。 若需网采浮游植物，则用浅水川 型网。 其操作步骤如下： 每次下网前应检查网具有否破损，发现破损应及时修补或更换网衣；检查网底管和流星计是否 处于正常状态，并把流量计指针拨至指零；放网入水，当网口贴近水面时，需调整计数器指针于 零的位置；网口入水后，下网速度一般不能超过 1 m/s, 以钢丝绳保持紧直为准；当网具接近海 底时，绞车应减速，当沉锤着底，钢丝绳出现松弛时，应立即停车，记下绳长； 网具到达海底后可立即起网，速度保持在 0. 5 m/s 左右；网口未露出水面前不可停车；网口离 uJ

开水面时应减速并及时停车，谨防网具碰刮船底或卡环碰撞滑轮，使钢丝绳绞断，网具失落；把网升至适当高度，用冲水设备自上而下反复冲洗网衣外表面（切勿使冲洗的海水进人网口），使粘附于网上的标本集中于网底管内：将网收入甲板，开启网底管活门，把标本装入标本瓶，再关闭网底管活门，用洗耳球吸水冲洗筛绢套，如此反复多次，直至残留标本全部收人标本瓶中；一按样品体积的5%，加入甲醛溶液进行固定。5.2.2.3.3分层拖网采样分层采集，应在网具上装置闭锁器，按规定层次逐一采样。操作步骤为：下网前应使网具、闭锁器、钢丝绳、拦腰绳等处于正常采样状态，下网时按垂直拖网方法；一网具降至预定采样水层下界时应立即起网，速度如垂直拖网；当网将达采样水层上界时，应减慢速度（避免停车，以防样品的外溢），提前打下使锤（提前量每10m水深约1m）；当钢丝绳出现瞬间松弛或振动时，说明网已关闭（记录此时的绳长），可适当加快起网速度直至网具露出水面：之后，将闭锁状态的网具恢复成采样状态，并按垂直拖网法冲网和收集、固定标本：一各项样品采样完毕，应及时将采样记录详细记人表A.1或表A.2。5.2.2.3.4采样结束后的工作采样后应进行以下工作：一所有样品应装入牢固的标本箱内搬运；一用过的网具、闭锁器和流量计等需用淡水冲洗，晾干后收藏；绞车、钢丝绳、计数器等需经擦试，上油保养。5.2.2.3.5注意事项采样时应注意以下事项：遇倾角超过45°时，应加重沉锤重新采样；遇网口刮船底或海底，应重新采样。5.3样品整理与分析5.3.1样品的整理5.3.1.1核对根据采样记录表，认真核对采取的全部样品，若发现不符应及时查找原因，不得任意更改原始记录。5.3.1.2编号依据海上采样记录，按序对各类样品进行总编号，并记入表A.3中。总编号力求简明，由能表示样品的采样海区，采集方式、采集网具、采集年份及标本序号的字母或代号表示，其规定如下：采集海区：用调查海区汉语拼音第一个字母表示；——【表示浅水I型浮游生物网垂直拖网样品；—Ⅱ表示浅水Ⅱ型浮游生物网垂直拖网样品；一Ⅲ表示浅水Ⅲ型浮游生物网垂直拖网样品；-L表示昼夜连续观测样品；—ch表示垂直分层采集样品：-S表示浮游植物采水样品；——年份用阿拉伯数字表示。5.3.1.3标签按以下要求对采集的样品贴标签：外标签：按总编号顺序编写，贴于各号标本瓶外，并涂腊或树脂保护；一内标签：按表4的式样（规格：4cm×2.5cm）填写，放入各标本瓶中。6

开水面时应减速并及时停车，谨防网具碰刮船底或卡环碰撞滑轮，使钢丝绳绞断，网具失落； 一把网升至适当高度，用冲水设备自上而下反复冲洗网衣外表面（切勿使冲洗的海水进入网口）， 使粘附于网上的标本集中于网底管内；将网收入甲板，开启网底管活门，把标本装入标本瓶，再 关闭网底管活门，用洗耳球吸水冲洗筛绢套，如此反复多次，直至残留标本全部收入标本瓶中； 按样品体积的 5%,加入甲醒溶液进行固定。 5.2.2.3.3 分层拖网采样 分层采集，应在网具上装置闭锁器，按规定层次逐一采样。 操作步骤为： 下网前应使网具、闭锁器、钢丝绳、拦腰绳等处于正常采样状态，下网时按垂直拖网方法； 网具降至预定采样水层下界时应立即起网，速度如垂直拖网；当网将达采样水层上界时，应减 慢速度（避免停车，以防样品的外溢），提前打下使锤（提前植每 10 m水深约 1 m); 当钢丝绳出 现瞬间松弛或振动时，说明网已关闭（记录此时的绳长），可适当加快起网速度直至网具露出水 面；之后，将闭锁状态的网具恢复成采样状态，并按垂直拖网法冲网和收集、固定标本； 各项样品采样完毕，应及时将采样记录详细记入表 A.1 或表 A. 2。 5.2.2.3.4 采样结束后的工作 采样后应进行以下工作： 一－所有样品应装入牢固的标本箱内搬运； 用过的网具、闭锁器和流械计等需用淡水冲洗，掠干后收藏； 绞车、钢丝绳、计数器等需经擦试，上油保养。 5.2.2.3.5 注意事项 采样时应注意以下事项： 一—遇倾角超过 45°时，应加重沉锤重新采样； 遇网口刮船底或海底，应重新采样。 5.3 样品整理与分析 5. 3. 1 样品的整理 5. 3. 1. 1 核对 根据采样记录表，认真核对采取的全部样品，若发现不符应及时查找原因，不得任意更改原始记录。 5. 3. 1. 2 编号 依据海上采样记录，按序对各类样品进行总编号，并记入表 A. :3中。 总编号力求简明，由能表示样 品的采样海区、采集方式、采集网具、采集年份及标本序号的字母或代号表示，其规定如下： 采集海区：用调查海区汉语拼音第一个字母表示； I 表示浅水 I 型浮游生物网垂直拖网样品； - II表示浅水II型浮游生物网垂直拖网样品； — III表示浅水III型浮游生物网垂直拖网样品； L 表示昼夜连续观测样品； ch 表示垂直分层采集样品； S表示浮游植物采水样品； － 年份用阿拉伯数字表示。 5. 3. 1. 3 标签 按以下要求对采集的样品贴标签： 外标签：按总编号顺序编写，贴于各号标本瓶外，并涂腊或树脂保护； 内标签：按表 4 的式样（规格：4 cmX2. 5 cm)填写，放入各标本瓶中。 6

表4内标签式样总编号年月日站号海上编号5.3.2浮游植物样品的处理与分析浮游植物水样的种类鉴定与计数，一般需按采样层次逐一分析。若时间不允许，在不影响计划要求前提下，可采用混合样计数，即各层取等量（50mL或100mL）混合，再按下述方法处理和分析。5.3.2.1沉降计数法5.3.2.1.1主要仪器和设备使用的主要仪器和设备如下：一倒置显微镜；=一沉降器：沉降器包括底板、沉降管、排水孔及盖玻片等。规格有5mL、10mL、20mL、50mL、100ml等不同容量。若无上述沉降器，可自己制作简易沉降器，只需取内径为25mm（外径约32mm）、高度为20.4mm的有机玻璃管粘于43mm×40mm的载玻片上即可（其容积为10mL.），可制作其他规格的简易沉降器，但使用前需对其容积和底面积进行准确标定，并逐一编号；一盖玻片；计数器。5.3.2.1.2计数每个水样取三个分样计数，取平均值。计数操作过程如下：取三个等容量的沉降器，分别注满经摇匀的水样，盖上盖玻片使不留气泡，静置24h以上。分样体积大小需视水样浑浊度和浮游植物的丰度而定；可一次性准备几个待计数的样品；-轻移上述沉降器于倒置显微镜下鉴定、计数。浮游植物数量较少时，应计全数；一若数量较大或计数微型藻类时，可于高倍镜下计算一定面积上的细胞数，再依所计面积，换算为整个底面积上的总细胞数；鉴定、计数结果记人表A.4。5.3.2.2直接计数法5.3.2.2.1主要仪器和设备仪器和设备如下：显微镜；一计数框：取0.25mm厚的盖玻片，切割成细条状（宽约2.5mm），粘贴于普通载玻片上，务使框内边长分别为50.0mm和20.0mm，亦即框内面积为1000mm2，容积为0.25ml。框内载玻片上应刻划出1mm或0.5mm等距离垂线；取样管；可直接采用0.25mL的微型注射针筒，或取2mL分析用的移液管，截去上端，磨平，并装上小橡皮球即成；盖玻片。5.3.2.2.2计数每份水样计数三个分样，取平均值。按以下步骤操作：一一将待计数水样摇匀，准确吸取0.25mL置于计数框内，盖上盖玻片使不留气泡一移计数框于显微镜下鉴定计数。通常应按序计全数，若数量大，可考虑间行计数（若水样为未加固定剂的新鲜海水，计数前应向框内喷射少许醋酸蒸汽）；7

总编号 站 号 海上编号 5. 3.2 浮游植物样品的处理与分析 表4 内标签式样 年 月 日 浮游植物水样的种类鉴定与计数，一般需按采样层次逐一分析。 若时间不允许，在不影响计划要求 前提下，可采用混合样计数，即各层取等星(50 mL或lOOmU混合，再按下述方法处理和分析。 5. 3. 2. 1 沉降计数法 5. 3. 2. 1. 1 主要仪器和设备 使用的主要仪器和设备如下： 倒置显微镜； —一沉降器：沉降器包括底板、沉降管、排水孔及盖玻片等。 规格有 5 mL、 10 mL、20 mL、50 mL、 100 mL 等不同容星。 若无上述沉降器，可自己制作简易沉降器，只需取内径为 25 mm(外径 约 32 mm)、高度为 20.4 mm的有机玻璃管粘于 43 mmX 40 mm的载玻片上即可（其容积为 10 mL), 可制作其他规格的简易沉降器，但使用前需对其容积和底面积进行准确标定，并逐一 编号； －盖玻片； -� 计数器。 5. 3. 2. 1. 2 计数 每个水样取三个分样计数，取平均值。 计数操作过程如下： 取三个等容星的沉降器，分别注满经摇匀的水样，盖上盖玻片使不留气泡，静置 24 h以上。 分 样体积大小需视水样浑浊度和浮游植物的丰度而定；可一次性准备儿个待计数的样品； 轻移上述沉降器于倒置显微镜下鉴定、计数。 浮游植物数械较少时，应计全数； 若数措较大或计数微型藻类时，可于高倍镜下计算一定面积上的细胞数，再依所计面积，换算 为整个底面积上的总细胞数； 鉴定、计数结果记入表A. 4。 5.3.2.2 直接计数法 5. 3. 2. 2. 1 主要仪器和设备 仪器和设备如下： 显微镜； -� 计数框：取 0. 25 mm厚的盖玻片，切割成细条状（宽约 2.5 mm), 粘贴于普通载玻片上，务使框 内边长分别为 50.0 mm和 20. 0 mm, 亦即框内面积为 1 000 mm2 , 容积为 0.25 mL。 框内载 玻片上应刻划出1 mm或0. 5 mm等距离垂线； 取样管；可直接采用 0. 25 mL 的微型注射针简，或取 2 mL 分析用的移液管，截去上端，磨平， 并装上小橡皮球即成； － 盖玻片。 5. 3.2.2.2 计数 每份水样计数三个分样，取平均值。 按以下步骤操作： － 将待计数水样摇匀，准确吸取0. 25 mL置于计数框内，盖上盖玻片使不留气泡； －移计数框于显微镜下鉴定计数。 通常应按序计全数，若数量大，可考虑间行计数（若水样为未 加固定剂的新鲜海水，计数前应向框内喷射少许醋酸蒸汽）； 7

一本法适于赤潮发生期间或浮游植物细胞数量达每升105个以上时的计数；-将计数结果记人表A.4中。5.3.2.3浓缩计数法5.3.2.3.1仪器设备：与直接计数法相同。5.3.2.3.2计数按以下步骤操作：将静置24h以上的水样，用包扎有JF62或JPs号筛绢的吸管，轻轻吸去上清液，使水样浓缩至10mL。浓缩时切勿搅动沉淀样品，否则需重新静置24h后再浓缩。通常一次不可能浓缩成10mL，需把浓缩到一定体积的水样移至50mL左右的指形管中，经24h以上静置后再浓缩；将浓缩后的样品全部移人已经标记10mL容积的指形管中，静置24h后，用吸管轻吸多余的清液，使液面凹处恰在标记上；计数取样时，水样务必充分摇匀，用取样管迅速吸取0.25mL于计数框内，加盖盖玻片使不留气泡。之后的计数方法与直接计数法相同。计数结果记人表A.4中；网采样品，可适当浓缩（或稀释），按本法计数。5.3.2.4计数注意事项计数过程中应注意以下事项：计数时一般以种为单位分别计数。优势种、常见种、赤潮生物种应力求鉴定到种；-一凡失去色素或不足一半的残体，不在计数之列；一胶质团大群体和浮游兰藻类等不易计数的种类，可用数量等级符号（十十十、十十、十）表示；对进人浮游生物中的底栖种类，均按细胞记数，并将它们作为单项列人浮游植物总量中：填表时，应特别注意不同计数方法的水样量、沉降量、浓缩量（或稀释量）、计数面积或计数量，并进行必要的换算。5.3.3浮游动物样品的处理与分析浮游动物样品静置沉淀后进行必要浓缩，按序分别移人已备好内外标签的标本瓶中，测定其生物量及计数。5.3.3.1湿重生物量测定5.3.3.1.1主要仪器及设备仪器及设备如下：扭力天平：感量0.01g；一真空泵：10L；—布氏漏斗；一抽滤瓶；一筛绢：JF62或JP8o；一一吸水纸；一吸管；镊子。5.3.3.1.2测定测定步骤如下：筛绢标定：将上述筛绢剪成与漏斗内径等大，浸湿后铺于漏斗中，用真空泵抽去筛绢上多余水分，称取筛绢湿重并记录于表A，5中。该标定后的筛绢可反复使用；样品测定：把标定过的筛绢铺于漏斗中，开动真空泵，倒人已剔除杂质的欲测样品；待水分滤干后关闭真空泵；小心取出带样品的筛绢放在吸水纸上，吸去多余水分；将样品（连同筛）置于扭力天平称重，并将结果填于表A.6中的相应栏目中。8

本法适于赤潮发生期间或浮游植物细胞数量达每升 105 个以上时的计数； 将计数结果记入表A.4中。 5.3.2.3 浓缩计数法 5. 3. 2. 3. 1 仪器设备：与直接计数法相同。 5.3.2.3.2 计数 按以下步骤操作： 将静置24h以上的水样，用包扎有 JF62或 JPso号筛绢的吸管，轻轻吸去上清液，使水样浓缩至 10 mL。 浓缩时切勿搅动沉淀样品，否则需重新静置24 h 后再浓缩。 通常一次不可能浓缩成 10 mL, 需把浓缩到一定体积的水样移至 50 mL左右的指形管中，经24h 以上静置后再浓缩； 将浓缩后的样品全部移入已经标记 10 mL容积的指形管中，静置24 h后，用吸管轻吸多余的 清液，使液面凹处恰在标记上； 计数取样时，水样务必充分摇匀，用取样管迅速吸取 0.25 mL 于计数框内，加盖盖玻片使不留 气泡。 之后的计数方法与直接计数法相同。 计数结果记入表A.4中； 网采样品，可适当浓缩（或稀释），按本法计数。 5.3.2.4 计数注意事项 计数过程中应注意以下事项： 计数时一般以种为单位分别计数。 优势种、常见种、赤潮生物种应力求鉴定到种； — —凡失去色素或不足一半的残体，不在计数之列； 胶质团大群体和浮游兰藻类等不易计数的种类，可用数量等级符号（＋＋＋、＋＋、十）表示； 对进入浮游生物中的底栖种类，均按细胞记数，并将它们作为单项列入浮游植物总量中； 填表时，应特别注意不同计数方法的水样量、沉降量、浓缩量（或稀释量）、计数面积或计数量， 并进行必要的换算。 5.3.3 浮游动物样品的处理与分析 浮游动物样品静置沉淀后进行必要浓缩，按序分别移入已备好内外标签的标本瓶中，测定其生物量 及计数。 5. 3. 3. 1 湿重生物量测定 5. 3. 3. 1. 1 主要仪器及设备 仪器及设备如下： 扭力天平：感量 o. 01 g; 一 一真空泵：10 L; 布氏漏斗； 抽滤瓶； 筛绢：J贮或 JPso; 吸水纸； 吸管； 摄子。 5. 3. 3. 1. 2 测定 测定步骤如下： 8 — —筛绢标定：将上述筛绢剪成与漏斗内径等大，浸湿后铺于漏斗中，用真空泵抽去筛绢上多余水 分，称取筛绢湿重并记录于表A. 5中。 该标定后的筛绢可反复使用； 样品测定：把标定过的筛绢铺于漏斗中，开动真空泵，倒入已剔除杂质的欲测样品；待水分滤于 后关闭真空泵；小心取出带样品的筛绢放在吸水纸上，吸去多余水分；将样品（连同筛绢）置于 扭力天平称重，并将结果填于表A. 6中的相应栏目中

5.3.3.2体积生物量测定5.3.3.2.1仪器及设备仪器及设备如下：浮游生物体积测量器；一一滴定管：容量50mL；—真空泵：10L;抽滤瓶；一吸管；镊子。5.3.3.2.2测定测定操作过程如下：一测量器体积标定：将一定体积的水（如50.●mL）注人测量器中，排除底盖与筛组之间的气泡；旋转测量器顶端指针使针尖恰好接触液面，用固定螺丝固定好指针位置。打开底盖，倒出注入的水。一样品测定：将经除去杂质的样品倒入打开底盖的体积测量器中，用真空泵抽去样品中的水分；然后扭紧底盖，用滴定管（装有50.0mL5%甲醛海水固定液）从测量器加水孔注入该固定液，排除底盖与筛绢之间的气泡（用小吸管吸取）使液面恰好与指针针尖接触为止。此时滴定管中剩余的固定液量即为被测样品的体积。测定结果记录于表A，5中。5.3.3.3个体计数浅水I、Ⅱ型浮游生物网采集的样品分别用于大型和中、小型浮游动物（包括夜光藻）的种类鉴定和计数。5.3.3.3.1仪器及设备仪器及设备如下：———体视显微镜；普通显微镜；计数器；镊子；解剖针；计数框：取直径为8cm左右的培养血，于其内粘上若干玻璃条即可。玻璃条间距根据体视显微镜视野而定；取样管：将内径2.2cm的指形管底部截去、磨平，使成长约8cm的管子；剪取二块厚度约0.7cm橡皮塞，做成直径与管子内径相等的隔板；分别于两隔板的圆心和两侧打二个小孔，于圆心处套入一根内径2.5mm的玻璃管；将隔板装入上述管子中，使下隔板与管子下端的体积恰为10mL或5ml：另取一细铜棒（直径约2mm）做提柄，于下端连接一块略大于管子直径的圆铜板，板上粘上与铜板等大的橡皮垫；将此提柄插入管内，即构成取样管。取样时，将取样管插入已知体积的标本容器中，通过提柄的上下运动使样品混匀，然后迅速使橡皮垫封闭管子的下端再移出取样管，将取出的样品全部置于浮游动物计数框即可。5.3.3.3.2计数按以下步骤操作：，标本数量较少的应全部计数；一若数量较大，应先将个体大的标本（如水母、虾类、箭虫等）全部栋出分别计数；一其余样品稀释成适当体积，再用浮游动物取样管取样计数；计数结果记人表A.6和表A.7中。9

5. 3.3.2 体积生物量测定 5. 3. 3. 2. 1 仪器及设备 仪器及设备如下： 浮游生物体积测量器； 滴定管：容量 50 mL; － －真空泵： 10 L; － 抽滤瓶； 吸管； 摄子。 5. 3. 3. 2. 2 测定 测定操作过程如下： 测蜇器体积标定：将一定体积的水（如 50. O mL)注入测扯器中，排除底盖与筛绢之间的气泡； 旋转测扯器顶端指针使针尖恰好接触液面，用固定螺丝固定好指针位置。 打开底盖，倒出注入 的水。 样品测定：将经除去杂质的样品倒入打开底盖的体积测量器中，用真空泵抽去样品中的水分； 然后扭紧底盖，用滴定管（装有 50. O mL5% 甲醒海水固定液）从测星器加水孔注入该固定液， 排除底盖与筛绢之间的气泡（用小吸管吸取）使液面恰好与指针针尖接触为止。 此时滴定管中 剩余的固定液械即为被测样品的体积。 测定结果记录于表 A. 5 中。 5.3.3. 3 个体计数 浅水I、II型浮游生物网采集的样品分别用于大型和中、小型浮游动物（包括夜光藻）的种类鉴定和 计数。 5. 3. 3. 3. 1 仪器及设备 仪器及设备如下： 体视显微镜； 普通显微镜； 计数器； 摄子； 解剖针； 计数框：取直径为8 cm 左右的培养皿，于其内粘上若干玻璃条即可。 玻璃条间距根据体视显 微镜视野而定； 取样管：将内径 2. 2 cm 的指形管底部截去、磨平，使成长约 8 cm 的管子；剪取二块厚度约 0. 7 cm橡皮塞，做成直径与管子内径相等的隔板；分别于两隔板的圆心和两侧打二个小孔，于 圆心处套入一根内径 2. 5 mm 的玻璃管；将隔板装入上述管子中，使下隔板与管子下端的体积 恰为 10 mL 或 5 mL; 另取一细铜棒（ 直径约 2 mm)做提柄，于下端连接一块略大于管子直径 的圆铜板，板上粘上与铜板等大的橡皮垫；将此提柄插入管内，即构成取样管。 取样时，将取样 管插入已知体积的标本容器中，通过提柄的上下运动使样品混匀，然后迅速使橡皮垫封闭管子 的下端再移出取样管，将取出的样品全部置于浮游动物计数框即可。 5.3.3.3.2 计数 按以下步骤操作： 标本数量较少的应全部计数； 若数扯较大， 应先将个体大的标本（如水母、虾类、箭虫等）全部拣出分别计数； 其余样品稀释成适当体积，再用浮游动物取样管取样计数； 计数结果记入表 A. 6 和表 A. 7 中