甘肃农业大学：《动物遗传学》课程教学资源（实验指导）实验五 果蝇的唾腺染色体的制片与观察

实验五果蝇的唾腺染色体的制片与观察 “、目的 通过对果蝇唾腺染色体的观察，了解巨染色体的特征，练习果蝇幼虫解剖技术及唾腺染色 体制片方法。 二、材料 果蝇三日龄幼虫 三、原理 果蝇幼虫期的唾腺细胞核非常大，唾腺染色体比其它细胞的染色体大200多倍。且总是处于 前期状态，两条同源染色体间有差别时，很容易看出来。例如，当一条染色体缺失一个片段时， 它的同源染色体在这一段不能配对，就会拱起来，形成一个弧状结构。此外，重复、倒位、易位 等染色体畸变也可看到，所以唾腺腺染色体是研究染色体畸变的好材料。 唾腺染色体上有明显的横纹，其相对大小和空间排列是恒定的，可以作为识别睡腺染色体 的标志。 四、实验准备 1.用具：双筒解剖镜，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片，培养皿。 2.药品：醋酸洋红或醋酸地衣红，冰醋酸，生理盐水0.7Nc1,1NHC1,蒸馏水，无水乙 醇。 五、实验步骤 1.取一干净的载玻片，其上滴一滴生理盐水，取一三龄幼虫置于生理盐水中，两手各握 枚解剖针，以左手针压住幼虫末端1/3处，另一针揿住幼虫头部，用力向前拉，把头部身体拉 开，腺体即随之而出。黑点是它的神经节，睡腺就在神经节的下面。 2.低倍显微镜下观察，睡腺是一对棒状的腺体，中间有一细丝相连，腺体由两层规则排 列的细胞组成。找到腺体后，用针剔除脂肪。 3.在载玻片上把幼虫其他部分除去，并用吸水纸吸去生理盐水。 4.在腺体上滴一滴1HC1,浸泡2-3分钟，HCL的作用是使组织疏松，易于压片和获得良好 的图象。 5.吸去HCL,滴一滴蒸馏水，再用吸水纸吸去，反复两次。 6.加一滴醋酸洋红（或醋酸地衣红）染液，染色30分钟。 7.加盖玻片、压片，显微镜观察

8。好的片子可以制成永久片，把片子依次移入含有下列溶液的培养皿中，固定液（冰醋 酸：酒精3：1，在固定液中的时间以盖玻片脱下来为准)一一纯酒精一一纯酒精一一二甲苯 二甲苯—一加拿大树胶封片。 9.待封胶干后观察，贴好标签。 六、作业 绘制你所看到的图象。 生植联 腺种脑 图.果蝇三令幼虫模式母 (哽腺在神经书下面)