安徽科技学院：《兽医临床诊断学》课程教学资源（实习实训）实验八 实验室血常规检验（一）

实验八实验室血常规检验（一） (红细胞、白细胞计数、红细胞沉降速度、血红蛋白、红细胞压积容量的检验方法)》 目的和要求 掌握红细胞及白细胞计数、血沉、血红蛋白、红细胞压积容量的检验操作方法。要求按本书所 选用的方法及注意事项进行操作，所得结果应基本正确。 内容和方法 纪细惑计数方法根多，常用显微镜计数法 1原理血液经稀释后，充入血细胞 数板， 用显微镜观察，计数一定容积内的红细胞数并换算成 每升血液中的红细胞数。 2.器材与试 (1)计数板计数各种血细胞专用量具。临床上最常用的是改良纽巴氏计算板。它是由一块特制 计数池两侧各有1条支柱，将盖玻片 的缝隙。在各池的平面玻璃上，刻划有 9m2面积的刻 我别 为9个大方格 每格长 宽各lmm 面积1m， 体积0 量0.1μ 为16个中方格 400个小方格，此为计数红细胞之用，见图8.和图82 计数池划线 24mm 2)盖玻片 专用于计数板的盖玻片呈长方形，厚度为0.4~0.7mm。通常大小是 或选用一次性定量10u1或20μ1毛细玻璃管、5ml吸管、中试管 释 十数器等。 化钠溶液 yem 氯化 酸使溶液成 晶硫 ,使红细胞不成串钱状) 5.0g 氯化高汞（固定红细胞，并具防腐作用 0.5g 200m 图8一2计数池的正面和侧面 3操作方法 红细胞稀释液3 威流管吸取全样品至0刻度处或吸血至刻度10处，红细跑稀释液用 2ml) 3)擦去吸管外壁多余的血液 将此血液吹入试管底部，再吸、吹数次，以洗出沙利氏管内 附的血细屏 (4)用吸管吸取以 颠倒混每汁物池与盖玻片接触处，即可白姚流入计数池内。注音一 释好的血液 充液不可过多或过少， 过多则溢出而流入两侧槽内，过少则计数池中形成空气泡，致使无法计数。 计数池充液法见图8-3。 图8一3计数室充液法 图8一4红细胞计数顺 (5)充池后待2~3mn,用低倍镜依次计数中央大方格内的四角和正中5个中方格内的红细胞。 计数时，先用低倍镜，光线要稍微暗些，找到计数池的格子后，把中央的大方格置于视野中，然 后转用高倍镜，在此中央大方格内选择四角与最中间的5个中方格（或用对角线的方法数5个中方 格)，每一中方格有16个小方格，所以总共计数80个小方格。计算时要注意压在左边双线上的红细 胞应计数在内，压在右边双线上的红细胞则不计数在内：同样，压在上线的计入，压在下线的不计 入，此即所谓“数左不数右，数上不数下”的计数法则。计数顺序见图84。 4.计算 5个中方格内红细胞数×5×10×200×10=5个中方格内红细胞数×1010

实验八 实验室血常规检验（一） （红细胞、白细胞计数、红细胞沉降速度、血红蛋白、红细胞压积容量的检验方法） 目 的 和 要 求 掌握红细胞及白细胞计数、血沉、血红蛋白、红细胞压积容量的检验操作方法。要求按本书所 选用的方法及注意事项进行操作，所得结果应基本正确。 内 容 和 方 法 （一）红细胞计数 红细胞（RBC）计数方法很多，常用显微镜计数法。 1.原理 血液经稀释后，充入血细胞计数板，用显微镜观察，计数一定容积内的红细胞数并换算成 每升血液中的红细胞数。 2.器材与试剂 （1）计数板 计数各种血细胞专用量具。临床上最常用的是改良纽巴氏计算板。它是由一块特制 的厚玻璃板构成，通过H形槽沟将其分为上下两个相同计数池。计数池两侧各有1条支柱，将盖玻片 盖于计数池的两侧支柱上，盖片与计数池间形成0.1mm高度的缝隙。在各池的平面玻璃上，刻划有 9m2面积的刻度，分为9个大方格，每格长、宽各1mm，面积1m2，体积0.1m3，容量0.1μl。四角每一 大方格都用单线划分为16个中方格，为计数白细胞之用。中央一个大方格用双线划分为25个中方 格，每个中方格又划分为16个小方格，共计400个小方格，此为计数红细胞之用，见图8-1和图8-2。 图8—1 计数池划线图 （2）盖玻片 专用于计数板的盖玻片呈长方形，厚度为0.4～0.7mm。通常大小是 24mm×20mm×0.6mm。 （3）沙利氏吸管或选用一次性定量10μl或20μl毛细玻璃管、5ml吸管、中试管。 （4）显微镜、计数器等。 （5）试剂稀释液 ①0.85％氯化钠溶液。 ②赫姆（Hayem）氏液。 氯化钠（使溶液成为等渗） 1.0g 结晶硫酸钠（增加溶液的密度，使红细胞不成串钱状） 5.0g 氯化高汞（固定红细胞，并具防腐作用） 0.5g 蒸馏水 200ml 溶解后加1％伊红溶液1滴，使呈红色，以便识别。 以上两种稀释液，任选一种即可。 图8—2 计数池的正面和侧面 3.操作方法 （1）取小试管1支，加红细胞稀释液3.98ml。 （2）用沙利氏吸血管吸取全血样品至20μl刻度处（或吸血至刻度10μl处，红细胞稀释液用 2ml）。 （3）擦去吸管外壁多余的血液，将此血液吹入试管底部，再吸、吹数次，以洗出沙利氏管内黏 附的血细胞，然后试管口加塞，颠倒混合数次。 （4）用吸管吸取以稀释好的血液，放于计数池与盖玻片接触处，即可自然流入计数池内。注意 充液不可过多或过少，过多则溢出而流入两侧槽内，过少则计数池中形成空气泡，致使无法计数。 计数池充液法见图8-3。 图8—3 计数室充液法 图8—4 红细胞计数顺序 （5）充池后待2～3min，用低倍镜依次计数中央大方格内的四角和正中5个中方格内的红细胞。 计数时，先用低倍镜，光线要稍微暗些，找到计数池的格子后，把中央的大方格置于视野中，然 后转用高倍镜，在此中央大方格内选择四角与最中间的5个中方格（或用对角线的方法数5个中方 格），每一中方格有16个小方格，所以总共计数80个小方格。计算时要注意压在左边双线上的红细 胞应计数在内，压在右边双线上的红细胞则不计数在内；同样，压在上线的计入，压在下线的不计 入，此即所谓“数左不数右，数上不数下”的计数法则。计数顺序见图8-4。 4.计算 5个中方格内红细胞数×5×10×200×106＝5个中方格内红细胞数×1010

式中5个中方格（即80个小方格）内的红细胞总数 ×5- ·5个中方格换算成1个大方格。 ×10- -1个大方格容积为0.1μ1，划算成1.0μ1 ×200- ,血液的稀释倍敖 ×106 由微升换算成升」 5.注意事项 1)红细胞计数是二项细致的工作，稍有粗心大意，就要快 就会引起计数不准。为避免计数不准，关 键是防凝、 坊止血液部分凝周 取抗凝 采血中应及时将血液与抗凝剂混匀。防 溶是指防止过分振摇而使红细胞溶解，或是器材用水洗后未用生理盐水冲洗而发生溶血，使计数结 果偏低。取样正确是指吸血10μ1或20μ一定要准确，吸血管外的血液要擦去，吸血管内的血液要全 部洗入稀释液中：稀释液的用量要准：充液量不可过多或过少，过多可使血盖片浮起，过少则计数 室中形成小的空气泡，使计数结果偏低甚至无法计数。此外，显微镜台未保持水平，使计数室内的 液体流向 作上的血管数精装每次用完后，先用清水吸吹数次，然后 戈红细胞稀释管 次数次 下次使用。血细胞计数板用蒸馏水冲洗后，用 即可，切不可用粗布擦拭，也不可用乙醚、酒精等溶剂冲洗。 健康动物红细胞数见表8-1。 表8一1健康动物红细胞数（万/位方毫米） 动物种类 平均数值 变动范围 00700 牛（包本牛） 600 900 8001100 山羊 1300 1000-1600 600 500~700 350 250-500 (二）白细胞计数 理 计数常 显微镜计数法 液将红细胞破坏后 ,混均充入计数池中，在显微镜下计数一定容积中的白细胞 数，经 求得 的相臀。细胞稀释液可用2%的冰醋酸液，内加%结品紫液1清。以 总数 与稀释液区别。 作方法 取小 入白细胞稀释液0.38ml。 学 些吸取被检爽式管中，反复吸取数次，以洗净管内所黏附的白细胞，充入 处 (4)用毛细吸管吸取被稀释的血液，充入己盖好盖玻片的计数室内，静置2~3mi后，待白细胞 下沉 (5)用低倍镜计数四角大格内的白细胞。计数方法和原则与红细胞计数相同。 4.计算 白细胞数L=四个大格白细胞数÷4×10×20×105 即：白细胞数L=四个大方格内白细胞数×50×10 式中：4 为每个大格内白细胞平均数。 ×10 一因一个大方格溶剂为0.1μ1，换算为1.0μ1。 ×20 ·血液稀释倍数。 X100 -将1u换算为L 5.注意事项与红细胞计数的注意事项同。初学者容易将尘埃异物与白细胞混淆，可用高倍镜观 察，白细胞有细胞核的结构，而尘埃异物的形状不规则，无细胞结构。 6.正常参考值健康动物白细胞数见表8-2。 表8一2健康动物白细胞数（个/位方毫米）

式中 5个中方格（即80个小方格）内的红细胞总数 ×5 —— 5个中方格换算成1个大方格。 ×10 —— 1个大方格容积为0.1μl，划算成1.0μl ×200 —— 血液的稀释倍数。 ×106 —— 由微升换算成升。 5.注意事项 （1）红细胞计数是一项细致的工作，稍有粗心大意，就会引起计数不准。为避免计数不准，关 键是防凝、防溶、取样正确。防凝是指采取末梢血液的动作要快，防止血液部分凝固。取抗凝血 时，抗凝剂的量要合适，不可过少使血液部分呈小块凝集；采血中应及时将血液与抗凝剂混匀。防 溶是指防止过分振摇而使红细胞溶解，或是器材用水洗后未用生理盐水冲洗而发生溶血，使计数结 果偏低。取样正确是指吸血10μl或20μl一定要准确，吸血管外的血液要擦去，吸血管内的血液要全 部洗入稀释液中；稀释液的用量要准；充液量不可过多或过少，过多可使血盖片浮起，过少则计数 室中形成小的空气泡，使计数结果偏低甚至无法计数。此外，显微镜台未保持水平，使计数室内的 液体流向一侧，这些操作上的错误均可使计数结果不准确。 （2）器械清洗方法 沙利氏吸血管或红细胞稀释管，每次用完后，先用清水吸吹数次，然后在蒸 馏水、酒精、乙醚中，按次序分别吸吹数次，干后备下次使用。血细胞计数板用蒸馏水冲洗后，用 绒布轻轻擦干即可，切不可用粗布擦拭，也不可用乙醚、酒精等溶剂冲洗。 6.正常参考值 健康动物红细胞数见表8-1。 表8—1健康动物红细胞数（万/立方毫米） 动物种类 平均数值 变动范围 马 650 600~700 牛（包括水牛） 600 550~700 绵羊 900 800~1100 山羊 1300 1000~1600 猪 600 500~700 鸡 350 250~500 （二）白细胞计数 白细胞（WBC）计数常用显微镜计数法。 1.原理 用稀释液将红细胞破坏后，混均充入计数池中，在显微镜下计数一定容积中的白细胞 数，经换算求得每升血液中的白细胞总数。 2.器材与试剂 与红细胞计数相同。白细胞稀释液可用2％的冰醋酸液，内加1％结晶紫液1滴，以 便与红细胞稀释液区别。 3.操作方法 （1）取小试管1支，加入白细胞稀释液0.38ml。 （2）用沙利氏吸血管吸取被检血至20μl处。 （3）擦去管外黏附的血液，吹入小试管中，反复吸取数次，以洗净管内所黏附的白细胞，充入 振荡混合。 （4）用毛细吸管吸取被稀释的血液，充入已盖好盖玻片的计数室内，静置2～3min后，待白细胞 下沉。 （5）用低倍镜计数四角大格内的白细胞。计数方法和原则与红细胞计数相同。 4.计算 白细胞数/L＝四个大格白细胞数÷4×10×20×106 即：白细胞数/L＝四个大方格内白细胞数×50×106 式中÷4 —— 为每个大格内白细胞平均数。 ×10 —— 因一个大方格溶剂为0.1μl，换算为1.0μl。 ×20 —— 血液稀释倍数。 ×106 —— 将1μl换算为1L。 5.注意事项 与红细胞计数的注意事项同。初学者容易将尘埃异物与白细胞混淆，可用高倍镜观 察，白细胞有细胞核的结构，而尘埃异物的形状不规则，无细胞结构。 6.正常参考值 健康动物白细胞数见表8-2。 表8—2健康动物白细胞数（个/立方毫米）

动物种类 平均数值 变动范围 8000 7000-9000 黄牛、奶牛 7500 7000-8000 880 8000000 00- 20000 18000-30000 (三)红细胞沉降速度的测定 也称血沉(ESR) 是指抗凝血在特制的血沉管中在单位时间内，红细胞下降的毫米数。其方法 很多，主要介绍魏氏和涅氏两种方法。 1原理红细胞沉降速度与红细胞钱串状的形成、红细胞数目的多少、血浆蛋白的组成以及测定时 室温的变化、血沉管倾斜的程度等因素有关。 2.器材与试剂 (1)魏氏血沉管、特制血沉架、涅氏血沉管、采血针头等。 (2)抗凝剂109mmol/L枸橼酸钠液。 3操作方法 (1)魏氏法魏氏血沉管长30cm,内径为2.5mm,管壁有200个刻度，每一刻度之间距离为 1mm,附有特制的血沉架见图8-5。测定方法如下： ①取3.8%枸橼酸钠液0.4ml置于小试管中。 ②自颈静脉采血1.6ml,加入上述试管，轻轻混合。 ③用血沉管吸取抗凝血至刻度0处，用棉花擦去管外血液，直立于血沉架上。 ④经15、30、45、60min,分别记录红细胞沉降的刻度数，用分数形式表示（分母代表时间，分 子代表沉降mm数)。 图8 5魏氏血沉架装置 (2)涅氏法涅氏血沉管有两种， 种仅有100个刻度，称为“六五”型血沉管：另一种除有100 个刻度供测定血沉用之外，一侧自上而下标有20~125，用来表示血红蛋白的百分数，管中央自上而 下标有1~13，用来表示红细胞数（百万/mm3),这种管子特称为三用血沉管。二者测定血沉的结果 是一致的，故可通用。测定方法是：向涅氏血沉管内加入10%EDTA二钠液4滴或加入草酸钠粉0.02 ~0.04g。自颈静脉采血，沿管壁接取血液至刻度“0”处，轻轻颠倒混合数次。垂直立于试管架上， 经15、30、45、60min,分别读取红细胞沉降的数值。 4.注意事项 (1)血沉管必须垂直静立（牛、羊的血液，血沉速度很慢，可倾斜60°，以加速沉降。注意， 其正常值也相应增加)：血液柱面上不应有气泡：抗凝剂的量要按规定加入。 (2)报告结果时，必须注明是用什么方法测定的。 (四)血红蛋白的测定 血红蛋白(Homoglobin,Hb)的测定常用沙利氏(Sahli)比色法， 1.原理表面活性剂溶解红细胞膜，释放血红蛋白。血红蛋白被高铁氟化钾氧化为高铁血红蛋白 (H),在一定的PH下，H与氰离子(CNˉ)结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白 HiCN在波长54Onm处有一吸收峰，测定其吸光度，可求得血红蛋白浓度(gL)。 2.器材与试剂 (1)分光光度计 (2)试剂HiCN转化液。 氯化钾 50mg 高铁氧化钾 200m 无水磷酸二氢钾 114m TritonX-100(或其他非离子表面活性剂) 10m 蒸馏水 1000ml 配成后用滤纸过滤，置棕色瓶中，塞紧后保存于冷暗处，但勿使结冰，可保存数月。此液应透 明、淡黄色，pH在7.0~7.4之间，以蒸馏水作空白，用540nm比色，吸光度应小于0.001。若变浑、变 绿或发生浑浊则应废弃。 3.操作方法 (1)取血液20μ1加入5ml血红蛋白转化液中，充分混匀，静置5min

动物种类 平均数值 变动范围 马 8000 7000~9000 黄牛、奶牛 7500 7000~8000 水牛 8800 8000~9000 绵羊 8500 8000~9500 山羊 10000 7000~13000 猪 13000 11000~16000 鸡 20000 18000~30000 （三）红细胞沉降速度的测定 也称血沉（ESR），是指抗凝血在特制的血沉管中在单位时间内，红细胞下降的毫米数。其方法 很多，主要介绍魏氏和涅氏两种方法。 1.原理 红细胞沉降速度与红细胞钱串状的形成、红细胞数目的多少、血浆蛋白的组成以及测定时 室温的变化、血沉管倾斜的程度等因素有关。 2.器材与试剂 （1）魏氏血沉管、特制血沉架、涅氏血沉管、采血针头等。 （2）抗凝剂 109mmol/L枸橼酸钠液。 3.操作方法 （1）魏氏法 魏氏血沉管长30cm，内径为2.5mm，管壁有200个刻度，每一刻度之间距离为 1mm，附有特制的血沉架见图8-5。测定方法如下： ①取3.8％枸橼酸钠液0.4ml置于小试管中。 ②自颈静脉采血1.6ml，加入上述试管，轻轻混合。 ③用血沉管吸取抗凝血至刻度0处，用棉花擦去管外血液，直立于血沉架上。 ④经15、30、45、60min，分别记录红细胞沉降的刻度数，用分数形式表示（分母代表时间，分 子代表沉降mm数）。 图8—5 魏氏血沉架装置 （2）涅氏法 涅氏血沉管有两种，一种仅有100个刻度，称为“六五”型血沉管；另一种除有100 个刻度供测定血沉用之外，一侧自上而下标有20～125，用来表示血红蛋白的百分数，管中央自上而 下标有1～13，用来表示红细胞数（百万/mm3），这种管子特称为三用血沉管。二者测定血沉的结果 是一致的，故可通用。测定方法是：向涅氏血沉管内加入10％EDTA二钠液4滴或加入草酸钠粉0.02 ～0.04g。自颈静脉采血，沿管壁接取血液至刻度“0”处，轻轻颠倒混合数次。垂直立于试管架上， 经15、30、45、60min，分别读取红细胞沉降的数值。 4.注意事项 （1）血沉管必须垂直静立（牛、羊的血液，血沉速度很慢，可倾斜60°，以加速沉降。注意， 其正常值也相应增加）；血液柱面上不应有气泡；抗凝剂的量要按规定加入。 （2）报告结果时，必须注明是用什么方法测定的。 （四）血红蛋白的测定 血红蛋白（Homoglobin，Hb）的测定常用沙利氏（Sahli）比色法。 1.原理 表面活性剂溶解红细胞膜，释放血红蛋白。血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白 （Hi），在一定的PH下，Hi与氰离子（CN–）结合生成稳定的棕红色氰化高铁血红蛋白 （HiCN）。HiCN在波长540nm处有一吸收峰，测定其吸光度，可求得血红蛋白浓度（g/L）。 2.器材与试剂 （1）分光光度计。 （2）试剂HiCN转化液。 氰化钾 50mg 高铁氰化钾 200mg 无水磷酸二氢钾 114mg TritonX－100（或其他非离子表面活性剂） 1.0ml 蒸馏水 1000ml 配成后用滤纸过滤，置棕色瓶中，塞紧后保存于冷暗处，但勿使结冰，可保存数月。此液应透 明、淡黄色，pH在7.0～7.4之间，以蒸馏水作空白，用540nm比色，吸光度应小于0.001。若变浑、变 绿或发生浑浊则应废弃。 3.操作方法 （1）取血液20μl加入5ml血红蛋白转化液中，充分混匀，静置5min

(2)用分光光度计比色，波长540nm,光径1cm,以转化液或蒸馏水作为空白，测定吸光度 (A)。 4.注意事项 (1)可用末梢血液直接测定，静脉血按每毫升血液1.5 ngEDTA二钠的比例抗凝，不可用肝素抗 凝（可致混浊） (2)HCN法结果准确可靠，操作简便，但试剂中KCN为剧毒，在配制和保存过程中，应提高警 惕，防止污染。用于大量标本时，应注意废液处理，可用解毒液解毒，即按每升加次氯酸钠3.5混 匀后敞开过夜，使CN~氧化成CO2和N2挥发后，在排入下水道。 5.计算 血红蛋白(gL)=测定管吸光度×(64458÷44000)×251 =测定吸光度×367.7 式中64458 目前国际公认的血红蛋白平均分子量。 44000 25 将售际直液标准化委员会公布的血红蛋白摩尔吸光度。 6.正常参考值健康动物血红蛋白参考值见表8-3 表8一3动物血红蛋白正常值 动物和种尖 血红蛋白值（克/100ml) 马、骡 11.0(9.013.0 10.0(9.0≈11.0 g8880 猪鸡 120 12.5(10.014.5 红 容 理在1 度玻c 火抗凝 读取红细胞 即为红细胞压积容量】 2.器材和试 所占的百分比， 泪氏 答壁右100个 侧自上而下标有0~ 10,供测定血沉用 度的小玻璃管代替 (2)长针头及胶皮乳头选用长12~15cm的针头，将针尖剪去并磨平，针柄部接以胶皮乳头。也 可用细长微细吸管代替 "(3)转速能达4000rmin。 3.操作方法 (1)用长针头吸满抗凝血，插入温氏管底部，轻捏胶皮乳头，自下而上挤入血液至刻度10处。 (2)置离心机中，以3000r/min的速度离心30~45min(牛、羊的血液离心45min),取出观察， 记录红细胞层高度，再离心5mn,如与第一次离心的高度一致，此时红细胞柱层所占的刻度数，即 为PCV数值，用百分数表示。 图8一6温氏红细胞压积测定管及冲液长针头 4.注意事项 (1)温氏管及充液用具必须干燥，以免溶血。 (2)离心时，离心机的转速必须达到3000rmin以上，并遵守所规定的时间。 (3)用一般离心机离心后，红细胞层呈斜面，读取时应取斜面12处所对应的刻度数。血浆与红 细胞层之间的灰白层是白细胞与血小板组成，不应计算在内。 5正常参老值名种动物PCV正常值在30%一40%之间

（2）用分光光度计比色，波长540nm，光径1cm，以转化液或蒸馏水作为空白，测定吸光度 （A）。 4.注意事项 （1）可用末梢血液直接测定，静脉血按每毫升血液1.5mgEDTA二钠的比例抗凝，不可用肝素抗 凝（可致混浊）。 （2）HiCN法结果准确可靠，操作简便，但试剂中KCN为剧毒，在配制和保存过程中，应提高警 惕，防止污染。用于大量标本时，应注意废液处理，可用解毒液解毒，即按每升加次氯酸钠3.5ml混 匀后敞开过夜，使CN–氧化成CO2和N2挥发后，在排入下水道。 5.计算 血红蛋白（g/L）＝测定管吸光度×（64 458÷44 000）×251 ＝测定吸光度×367.7 式中 64 458 —— 目前国际公认的血红蛋白平均分子量。 44 000 —— 1965年国际血液标准化委员会公布的血红蛋白摩尔吸光度。 251 —— 稀释倍数。 6.正常参考值 健康动物血红蛋白参考值见表8-3。 表8—3动物血红蛋白正常值 动物种类 血红蛋白值（克/100ml） 马、骡 11.0（9.0～13.0） 牛 10.0（9.0～11.0） 水牛 8.3（8.0～9.0） 羊 9.8（7.8～11.6） 猪 10.5（9.5～12.0） 鸡 12.5（10.0～14.5） （五）红细胞压积容量（PCV）测定 红细胞压积容量（packed cell volum，PCV）又叫压容和比容，是一种简单、实用的检查方法。 1.原理 在100刻度玻璃管中，充入抗凝血，经一定时间离心后，红细胞下沉并紧压于玻璃管中， 读取红细胞柱所占的百分比，即为红细胞压积容量。 2.器材和试剂 （1）温氏（Wiritrobe）管 管长11cm，内径约2.5mm，管壁有100个刻度。一侧自上而下标有0～ 10，供测定血沉用，另一测标有10～0，供测定比容用见图8-6。如无这种特制的管子，可用有100刻 度的小玻璃管代替。 （2）长针头及胶皮乳头 选用长12～15cm的针头，将针尖剪去并磨平，针柄部接以胶皮乳头。也 可用细长微细吸管代替。 （3）转速能达4000r/min。 3.操作方法 （1）用长针头吸满抗凝血，插入温氏管底部，轻捏胶皮乳头，自下而上挤入血液至刻度10处。 （2）置离心机中，以3000r/min的速度离心30～45min（牛、羊的血液离心45min），取出观察， 记录红细胞层高度，再离心5min，如与第一次离心的高度一致，此时红细胞柱层所占的刻度数，即 为PCV数值，用百分数表示。 图8—6 温氏红细胞压积测定管及冲液长针头 4.注意事项 （1）温氏管及充液用具必须干燥，以免溶血。 （2）离心时，离心机的转速必须达到3000r/min以上，并遵守所规定的时间。 （3）用一般离心机离心后，红细胞层呈斜面，读取时应取斜面1/2处所对应的刻度数。血浆与红 细胞层之间的灰白层是白细胞与血小板组成，不应计算在内。 5.正常参考值 各种动物PCV正常值在30％～40％之间